文档介绍：胃肠安大鼠长期毒性试验
作者:梅学仁张振伦许俊然刘宁田义红
(单位:天津药物研究院)
摘要:胃肠安(6g/kg、3g/kg、1g/kg)三个剂量,给大鼠灌胃给药,
每天一次,连续给药二个月。结果发现 6g/kg 剂量组大鼠出现体重增
长缓慢等轻微毒性症状,停药两周后症状基本消失。3g/kg 剂量组长
期口服给药对大鼠无明显毒性,表明该剂量对大鼠为安全无毒性反应
计量。
观察连续灌胃给予胃肠安后由于积蓄对大鼠产生的毒性反应及
其严重程度,提供毒性反应的靶器官及其损害的可逆性,确定无毒反
应剂量,为拟定人用安全剂量提供参考。
受试药物:胃肠安原粉由天津乐仁堂制药厂提供,生产批号:
960826,含量:1g(生药)/1g,黄棕色粉末。用蒸馏水配制成一定
浓度混悬液,供大鼠灌胃给药,每天用时配制。
实验动物:wistar 种大鼠,由本院动物室提供(津实验设施准 001
号)。实验用大鼠 88 只,体重 95—130g,随机分成四组(对照、高、
中、低剂量组),每组 20 只(高剂量 28 只),雌、雄各半。分笼饲养
在由中央空调系统调控的观察室内,饮自来水,食块料(中央生物制
品检定所动物室生产)。
给药方法
根据药效学的最佳有效剂量及最大配制浓度和体积,本实验设计
三个剂量(即 1、3、和 6g/kg)给药组及一个对照组。每天上午 8:
30—10:30 灌胃给药一次,每周七天,连续给药两个月,给药体积
为 1ml/100g 体重(高剂量为 2ml/100g 体重),对照组给等体积蒸馏
水。
观察指标
给药两个月后各组处死 12 只动物(雌雄各半),停药两周后处死
其余动物。观察指标如下:
一般观察
给药后观察记录大鼠的行为状态、饮食、毛色、大小便和口、鼻、
眼及肛门等处黏膜有无分泌物等一般药物反应。每周称体重和进食量
一次。给药两个月和恢复各测定一次尿液生化指标(广州东方化学应
用研究所生产的八联试纸)。
血液学指标
末次给药后 24 小时由眼眶静脉丛采血,进行红细胞(RBC)、白
细胞(WBC)、血小板(PLT)计数及血红蛋白(HB)、凝血时间(CT)、
白细胞分类:(淋巴细胞:L、中性白细胞:N)和网织红细胞(REL)
的计数。
血清生化指标
末次给药后禁食 16 小时,戊巴比妥纳麻醉,眼眶静脉丛取血,
分离血清,用贝克曼 42 型生化分析仪测定天门冬氨酸氨基转移酶
(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮
(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)、总胆红素
(T—BIL)、肌酐(CREA)、总胆固醇(T—CHO)。
病理组织学检查
放血处死动物后,解剖进行脏器的肉眼观察,摘取心、肝、脾、
肺、肾、肾上腺、前列腺、睾丸、子宫、脑、胸腺用 TG328B 电子天
平称重,并计算脏器系数。除上述脏器外,另摘取胃、十二指肠、回
肠、结肠、淋巴结、卵巢、附睾等,均放入 10%福尔马林液中固定,
做石蜡切片,HE 染色,进行病理学检查。
用 t 测验法进行各给药组与对照组间显著性检查。-
一般药物反应
高剂量(6g/kg)组大鼠在给药期间体重增长缓慢,每只耗食量
略低于正常对照组(同给药体积大有关)。停药后体重及食量均恢复
到对照组水平,中、低剂量组未发现一般药物反应(表 1、2)。
对血液学指标的影响
给药两个月中剂量(3g/kg)组雌性大鼠血红蛋白含量低于正常
对照组(但属于正常值范围内波动,无剂量依赖关系),其它各组血
液生化指标与对照组比较未见明显异常。
停药两周后高剂量(6g/kg)组雄性大鼠血红蛋白含量低于对照组,
(但属于正常值范围内波动)。中、低剂量组大鼠血液学指标与对照
组比较未见明显异常。
对血清生化指标的影响
给药两个月,高剂量(6g/kg)组雌性大鼠白蛋白含量低于正常
对照组,中剂量(3g/kg)组血液生化指标未见异常。低剂量(1g/kg)
组雄性大鼠谷草转氨酶活性略高于正常对照组,雌性大鼠总蛋白含量
略低于正常对照组。
停药两周后高剂量(6g/kg)组雌性大鼠血糖含量略低于正常对
照组及低剂量(1g/kg)组雌性大鼠谷丙转氨酶活性略低于正常对照
组(但属于正常值范围波动),其它各给药组大鼠血液生化指标与对
照组比较未见明显异常(表 4)。
对大鼠尿液生化的影响
给药两个月高剂量(6g/kg)组雄性大鼠胆红素阳性率