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S3®図
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版本号:180410
BCA蛋白定量试剂盒
产品组成】
Component
SBJ-1001S
250T
SBJ-1001M
500T
Storeat
试剂(A):BCA试剂A
50ml
100ml
室温,避光
试剂(B):BCA试剂B
3ml
室温
试剂(C):蛋白标准(BSA)
20mg
20mg
室温
试剂(D):蛋白标准配制液
5ml
10ml
室温
保存条件】
室温,避光,6个月
产品概述】
目前世界上最常用的蛋白浓度检测方法是:BCA蛋白定量试剂盒(BCAProteinAssayKit)和Bradford蛋白定量试剂盒(BradfordProteinAssayKit)。BCA法与传统方法相比,更简单、更稳定、更灵敏度。BCA法测定蛋白浓度兼容性亦很好,不受大部分样本中其他成分的影响,对于5%以内的SDS、TritonX-100、Tween20、Tween80具有很好的兼容性,但BCA法测定蛋白浓度易受螯合剂、高浓度的还原剂等的影响,在BCA法测定蛋白浓度前应尽量使:EDTA浓度Wm10M,DTT浓度W1mM,2-%。
BCAProteinAssayKit在50〜1000卩g/ml浓度范围内有较好的线性关系,其最小检出量为25卩g/ml。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
使用方法】
1、取1ml蛋白标准配制液完全加入到含有20mg的蛋白标准(BSA)中,充分溶解,后配制成20mg/ml的蛋白标准溶液,配制后可立即使用,配制的蛋白标准溶液应-20r保存。
2、取适量的20mg/ml蛋白标准溶液,稀释至终浓度为500ug/ml或所需浓度。如取25ul20mg/ml蛋白标准,加入975ul稀释液,充分混匀,即配制成500ug/ml蛋白标准溶液。特别提示:待测蛋白溶解于什么样的稀释液中,蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中,例如待测蛋白溶解于蔗糖中,亦取20mg/ml蛋白标准溶解于蔗糖中。%NaCl或PBS作为溶解BSA稀释液,稀释后的500ug/ml蛋白标准溶液也应-201长期保存。
3、根据样品数量,按试剂(A):试剂(B)=50:1的比例配制BCA工作液,即取50份BCA试剂A和1份BCA试剂B,充分混匀,即获得BCA工作液。,,BCA工作液室温24小时内稳定。
4、将500ug/ml蛋白标准溶液按0、1、2、4、8、12、16、20ul加到96孔板或EP管中,加稀释液补足至20ul,其蛋白标准浓度依次为0、25、50、100、200