文档介绍：酶法制备葡萄糖酸钙
月饼小分队:白朋纲
杨梦雪
姜昌熊
张雪冰
钙是体内含量最大的无机物,为维持人体神经,肌肉,骨骼系统,细胞膜和毛细血管通透性正常功能所必需。
葡萄糖酸钙在中国和许多国家的药典里都有收藏,是一种我们比较熟悉的的药物,葡萄糖酸钙常常被用来做补钙剂。它有利于人体骨质的形成,对青少年骨骼发育有促进作用,同时由于它是一种抗过敏溶解度高,生理活性大的钙营养药,可以治疗生理性缺钙症和血钙引起的手足抽搐、痉挛等症,以及治疗软骨、佝偻等缺钙症。
发酵法:营养盐和黑霉菌种子营养液,进行发酵。发酵液加石灰乳中和,过滤,滤液减压浓缩,结晶得到粗品,经精制得到葡萄糖酸钙。
(生产成本较高,纯化工艺较复杂)
试验原理
(1)α-淀粉酶(EC )又称液化型淀粉酶,它作用于淀粉时,随机的从淀粉分子内部切开α-1,4糖苷键,使淀粉水解成糊精和一些还原糖。
(2)糖化酶(EC )又称葡萄糖淀粉酶,它作用于淀粉时,从淀粉分子的非还原端开始逐个地水解α-1,4糖苷键,生成葡萄糖和一些低聚糖,且糖化酶还有一定的水解α-1,6糖苷键和α-1,3糖苷键的能力
(C6H10O5)n +nH2O
nC6H10O6
α-淀粉酶
糖化酶
试验原理
(3)葡萄糖氧化酶(EC )是一种糖蛋白,它能够特异性的氧化β-D-葡萄糖生成中间产物D-葡萄糖酸- δ-内酯和过氧化氢,并发生非酶促反应水解为葡糖酸。
(4)过氧化氢酶()它以过氧化氢作为专一的底物,催化过氧化氢分解为水和氧气保护酶受到过氧化氢的毒害。
4C6H12O6+3O2+2H2O
4C6H12O7+2H2O2
葡萄糖氧化酶
2C6H12O7+CaCO3
Ca(C6H11O7)2+CO2+H2O
2H2O2
2H2O+O2
过氧化氢酶
实验器材
500ML烧杯, PH试纸, 玻璃棒, 水浴锅, 电炉, 石棉网, 温度计, 滤纸, 漏斗, 电子天平, 量筒等常用试验用器材
试验试剂
淀粉, a-淀粉酶, 糖化酶, 葡萄糖氧化酶, 过氧化氢酶, NaOH Na2CO3 ,CaCO3, CaCl2, 碘液,活性炭等等
操作步骤
一,葡萄糖标准曲线
配置5个梯度浓度的葡萄糖标准溶液
各取1mL分装于五支试管中
设置一个空白组
分别加入2mL DNS试剂
沸水浴中2min后取出
加蒸馏水至15mL
测定吸光值,获得标准曲线
操作步骤
45g淀粉+150ml水搅拌
Na2CO3调节pH=6--
加入a-淀粉酶,72℃加热搅拌15min
再加热至90℃30min
淀粉糊化
加热到沸腾10min,酶失活
二,液化
冷却至55-60℃
加入糖化酶
调节ph=
于60-65℃恒温水浴糖化3-4h
加入活性炭,在80℃搅拌30min
抽滤,得到透明糖液
测量葡萄糖含量
三,糖化
操作步骤
四,双酶氧化
葡萄糖+CaCO3 (过量)
加过氧化氢酶和葡萄糖氧化酶
35℃搅拌反应,通过pH判断反应进行的程度
反应结束,加活性炭脱色
获得葡萄糖酸钙溶液
操作步骤