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液相色谱柱效测定.docx

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液相色谱柱效测定.docx

文档介绍

文档介绍:高效液相色谱柱柱效测定及分离条件考察
一、 实验目的
了解高效液相色谱仪的基本结构和工作原理
学****高效液相色谱仪的使用
学****掌握液相色谱柱柱效测定方法
二、 基本原理
高效液相色谱法是以液体作为流动相的一种色谱分析法,它亦是根高效液相色谱柱柱效测定及分离条件考察
一、 实验目的
了解高效液相色谱仪的基本结构和工作原理
学****高效液相色谱仪的使用
学****掌握液相色谱柱柱效测定方法
二、 基本原理
高效液相色谱法是以液体作为流动相的一种色谱分析法,它亦是根据不同组分在流动相和固定相之 间的分配系数的差异来对混合物进行分离的。气相色谱中评价色谱柱柱效的方法及计算理论塔板数的公 式同样适合于高效液相色谱,即:
n =
=16
式中:tR为组分的保留时间
y1/2为色谱峰的半峰宽度
Y为色谱峰的峰底宽度
影响高效液相色谱分离的因素很多,其中,流动相的种类及配比是最重要的参数。
三、 仪器和试剂
仪器:Agilent 1200高效液相色谱仪(紫外检测器)
50四L微量进样器
试剂:苯、萘、联苯、甲醇均为分析纯;纯水为重蒸的去离子水。
四、 实验条件
色谱柱 长15cm,,装填5^m的C-18烷基键合固定相
流动相 组成1 :甲醇:水(95:5);组成2:甲醇:水(85:15);
紫外光度检测器波长254nm
进样量5gL
五、 实验步骤
设定流动相为“组成1”的比例,按照标准操作步骤将仪器调节至进样状态,待仪器流路及电路 系统达到平衡,且色谱基线达到平直时,开始进样。
吸取5gL苯、萘、联苯的甲醇溶液进样,在此条件

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