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第十一章 基因工程和基因组学.docx

上传人:kunpengchaoyue 2022/8/12 文件大小:69 KB

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文档介绍:第十一章基因工程和基因组学[关闭窗口]
本章****题
:基因工程、限制性内切酶、限制、粘性末端、重组DNA分子、运载工具、质粒、核基因库、染色体基因库、cDNA库、人工合成基因、植物基因转化、DNA芯片技术、分子标记辅助科学的结合,收集、加工和分析生物资料和信息。
2.什么是遗传工程?它在理论上和实践上有什么意义?
答:遗传工程是将分子遗传学的理论与技术相结合,用来改造、创建动物和植物新品种、工业化生产生物产品、诊断和治疗人类遗传疾病的一个新领域。
广义的遗传工程包括细胞工程、染色体工程、基因工程、细胞器工程等。狭义的遗传工程即是通常讲的基因工程。本章只涉及狭义的遗传工程,即基因工程。
理论意义:遗传工程(基因工程)中的DNA重组主要是创造自然界中没有的DNA分子的新组合,这种重组不同于精
典遗传学中经过遗传交换产生的重组。
实践意义:遗传工程(基因工程)技术的建立,使所有实验生物学领域产生巨大的变革。在工厂化生产药品、疫苗和食品;诊断和治疗遗传疾病;培养转基因动植物等方面都有非常重大的意义,即基因工程技术已广泛用于工业、农业、畜牧业、医学、法学等领域,为人类创造了巨大的财富。(详见第10题)。3.简述基因工程的施工步骤。
答:基因工程的施工由以下这些步骤:
⑴•从细胞和组织中分离DNA;
⑵刑用能识别特异DNA序列的限制性核酸内切酶酶切DNA分子,制备DN***段;
⑶•将酶切的DN***段与载体DNA(载体能在宿主细胞内自我复制连接),构建重组DNA分子;
⑷•将重组DNA分子导入宿主细胞,在细胞内复制,产生多个完全相同的拷贝,即克隆;
⑸•重组DNA随宿主细胞分裂而分配到子细胞,使子代群体细胞均具有重组DNA分子的拷贝;
⑹•从宿主细胞中回收、纯化和分析克隆的重组DNA分子;
⑺•使克隆的DNA进一步转录成mRNA、翻译成蛋白质,分离、鉴定基因产物。
,以下材料起什么作用。
(1)载体;(2)限制性核酸内切酶;(3)连接酶;(4)宿主细胞;(5)***化钠
答:(1)・载体:经限制性酶酶切后形成的DN***段或基因,不能直接进入宿主细胞进行克隆。一个DN***段只有与适合的载体DNA连接构成重组DNA后,在载体DNA的运载下,才可以高效地进入宿主细胞,并在其中复制、扩增、克隆出多个拷贝。可作为DNA载体的有质粒、噬菌体、病毒、细菌和酵母人工染色体等。
(2)・限制性核酸内切酶:限制性核酸内切酶是基因工程的基石。在细菌中这些酶的功能是降解外来DNA分子,以限制
或阻止病毒侵染。这种酶能识别双链DNA分子中一段特异的核苷酸序列,在这一序列内将双链DNA分子切断。
⑶•连接酶:将外源DNA与载体相连接的一类酶。
⑷•宿主细胞:能使重组DNA进行复制的寄主细胞。
⑸•***化钠:主要用于DNA提取。在pH为8左右的DNA溶液中,DNA分子是带负电荷的,加入一定浓度的***化钠,使钠离子中和DNA分子上的负电荷,减少DNA分子之间的同性电荷相斥力,易于互相聚合而形成DNA钠盐沉淀。另外,***化钠也是细菌培养基的成分之一。
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5.有一个带有氨苄青霉素和四环素抗性的质粒,在其四环素抗性基因内有一个该质粒惟一的EcoRI酶切点,今欲用
EcoRI位点