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2、药物的含量测定
如巴比妥类药物的含量测定（巴比妥类药物在碱性介质中电离为具有紫外吸收特征的结构）、芳酸及其脂类药物含量测定、维生素A含量测定（在325~328nm的波长范围内有最大吸收）等。
三点校正用示差法。
即提高入射光强度，并采用浓度稍低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液。
设：待测溶液浓度为cx，标准溶液浓度为cs(cs < cx)。则：
Ax= εb cx As = εb cs
ΔＡ＝Ａx －Ａs =εb(cx － cs ）=εbΔc
测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的吸光度之差ΔＡ。示差法测得的吸光度与Δc呈直线关系。由标准曲线上查得相应的Δc值，则待测溶液浓度cx ：
cx = cs + Δc
双波长分光光度法
不需空白溶液作参比；但需要两个单色器获得两束单色光(λ1和λ2)；以参比波长λ1处的吸光度Aλ1作为参比，来消除干扰。在分析浑浊或背景吸收较大的复杂试样时显示出很大的优越性。灵敏度、选择性、测量精密度等方面都比单波长法有所提高。
ΔＡ＝A λ2 －A λ1 ＝（ελ2 －ελ1 ) b c
两波长处测得的吸光度差值ΔＡ与待测组分浓度成正比
（例子：课本366页）
导数分光光度法
导数分光光度法在多组分同时测定、浑浊样品分析、消除背景干扰、加强光谱的精细结构以及复杂光谱的辨析等方面，显示了很大的优越性。
利用吸光度(或透光度)对波长的导数曲线来进行分析：
Ｉ＝Ｉ0 e-εbc
假定入射光强度Ｉ0 在整个波长范围内保持恒定：
dI 0 /dλ＝0
则：dI/dλ＝－Ｉ0 bc e -εbc dε/dλ
＝－Ｉ0 bc dε/dλ
（例子：课本233页）
其他
卡尔曼滤波法
偏最小二乘法
小波变换
三波长分光光度法
系数倍率法
……
与紫外-可见法异同点
应用
荧光分析法
原理
原理
荧光—分子吸收电磁波后，从其最低激发态重新发射紫外线或可见光的现象
利用某些物质被一定波长的光照射后所产生的，能够反映该物质特性的荧光来进行定性定量的分析方法——荧光分析法。
在溶液中，当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC
光照
分子基态 激发态
辐射跃迁 荧光
若光源是：
由荧光波长可确定物质分子
可见-紫外光源 分子荧光分析法 具有结构
由荧光强度可测物质的含量
原子特征光谱作光源 原子荧光分析
X射线作光源 X射线荧光分析
构件
光源 ： 为高压***蒸气灯或氙弧灯，后者能发射出强度较大的连续光谱，且在300nm～400nm 范围内强度几乎相等，故较常用 。
激发单色器 ： 置于光源和样品室之间的为激发单色器或第一单色器，筛选出特定的激发光谱。
发射单色器：置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器，常采用光栅为单色器。筛选出特定的发射光谱
样品室： 通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。
检测器： 一般用光电管或光电倍增管作检测器。可将光信号放大并转为电信号。
荧光分析法与紫外-可见分析法异同点
荧光分析法与紫外-可见比较： 均属于分子光谱 仪器构造 基本相似
荧光 可见-紫外
本质 发射光谱 吸收光谱
灵敏度 10-10-10-12 g/ml 10-4-10-7g/ml
选择性