907-第2节 基因诊断与基因治疗.ppt

文档介绍：第2节 基因诊断与基因治疗
东莞中学生物科周平凡
一、从社会中来
恶性肿瘤的早期诊断?
产生胎儿的早期诊断?
SARS疑似患者的快速诊断?
二、目前临床疾病的诊断方法
临床诊断
血清免疫学诊断
生化学诊断
基因诊断
从基因水平提供更早期、更加准确的诊断依据
三、基因诊断的应用
感染性疾病的病原诊断
结核病、柯萨奇B3病毒感染的心肌炎、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV),爱滋病等
各种肿瘤的生物学特性的判断
遗传病的基因异常分析(包括产前诊断)
器官移植组织配型
法医学中个体识别、亲子鉴定
四、基因诊断的原理
核酸分子杂交是基因诊断的最基本的方法之一。
它的基本原理是:互补的DNA单链能够在一定条件下结合成双链,即能够进行杂交。
这种结合是特异的,即严格按照碱基互补的原则进行,它不仅能在DNA和DNA之间进行,也能在DNA和RNA之间进行。
四、基因诊断的原理
当用一段已知基因的核酸序列作出探针,与变性后的单链基因组DNA接触时,如果两者的碱基完全配对,它们即互补地结合成双链,从而表明被测基因组DNA中含有已知的基因序列。
进行基因检测有2个必要条件:一是必需的特异的DNA探针
二是必需的基因组DNA
当两者都变性呈单链状态时,就能进行分子杂交。
四、基因诊断的原理
一是必需的特异的DNA探针
探针的来源有3种:
(1)来自基因组中有关的基因本身,称为基因组探针(genomic probe);
(2)从相应的基因转录获得了mRNA,再通过逆转录得到的探针,称为cDNa 探针(cDNa probe)。
(3)还可在体外人工合成碱基数不多的与基因序列互补的DNA片段,称为寡核苷酸探针。
探针的标记:
为了确定探针是否与相应的基因组DNA杂交,有必要对探针加以标记,以便在结合部位获得可识别的信号,通常采用放射性同位素32P标记探针的某种核苷酸α磷酸基。
四、基因诊断的原理
二是必需的基因组DNA
PCR技术(1988)
DNA聚合酶链式反应
四、基因诊断的原理
五、基因芯片
通过微技术手段将大量特定序列的DNA片段(探针)有序地固定在尼龙膜、玻片或硅片上,从而能大量,快速、平行地对DNA分子的碱基序列进行测定和定量分析。