文档介绍：第五次普通微生物学实验
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二、实验原理

是根据微生物满足生长的营养需求，人工配制的混合营养基质。
必需的养分
适合的环支， ml
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注意事项
1、称取药品时严防药品混杂，一把牛角匙称一种药品；
2、蛋白胨极易吸湿，称取时动作要迅速；
3、配制固体培养基时，先将其他药品加热溶解到快沸时，再将称好的琼脂加入，继续加热至琼脂完全熔化，此过程要不断搅拌，以免琼脂糊底，并控制火力，防止沸腾外溢；
4、分装量根据试管大小和实际需要而定，固体培养基装量约为管高的1/5，液体培养基的装量约为管高的1/4，三角瓶的装量不超过瓶体的1/2 ；
5、分装过程中注意不要将培养基沾在管（瓶）口上，以免沾污棉塞而引起污染。
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实验12 灭菌和消毒
一、实验目的
学****微生物实验的一些准备方法（灭菌培养皿的准备、灭菌吸管的准备、无菌水的准备、培养基平板和斜面的准备等），为后续实验做准备。
了解消毒与灭菌应用范围及基本原理，学****并掌握实验室常用消毒与灭菌的方法
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二、实验原理灭菌是应用理化方法杀灭物体上所有微生物消毒是应用理化方法杀灭物体上部分微生物（主要是病原微生物）。
三、灭菌的常用方法
物理法：高温灭菌、紫外线灭菌、过滤除菌
化学法：化学药剂杀菌
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高温灭菌干热灭菌(dry heat sterilization)
：酒精灯、接种环
：干燥热空气箱160-170℃,2小时（利用热空气灭菌)
适用范围：金属器皿、玻璃器皿
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湿热灭菌(moist heat sterilization)
利用饱和热蒸汽灭菌。高压蒸汽灭菌锅采用高压蒸汽灭菌法是湿热灭菌的一种。利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升以达到高温灭菌目的的方法
a 方法：一般121℃（1kg/cm2或15磅/英寸2）20-30min。
b 适用：耐高温物品如培养基，无菌水，培养皿。
c 注意事项：灭菌开始排净冷空气；灭菌终了，自然缓慢降压回零；灭菌结束，趁热取出物品。
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高压蒸汽灭菌锅
原理：利用饱和热蒸汽灭菌。利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升以达到高温灭菌的目的。
方法：一般121℃（1kg/cm2或15磅/英寸2）20-30min。
适用：耐高温物品如培养基，无菌水，培养皿。
注意事项：灭菌开始，外筒加水，桶盖对称拧紧，排净冷空气；
灭菌终了，自然缓慢降压回零；
灭菌结束，趁热取出物品。
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四、高压蒸汽灭菌操作步骤
(1)灭菌前的准备：将高压蒸汽灭菌锅的内桶取出，向外锅内加入适量的水，将内桶放入。
(2)装放待灭菌物品：将已包扎好的物品放入内桶。盖上锅盖，以两两对称方式同时旋紧螺栓，勿使漏气。
(3)加热排气：接通电源，同时打开排气阀，待见有大量水汽排出时，维持3---5min，锅内空气排尽，关上排气阀。
(4)升温保压：★,℃,20~30min
(5)出锅；隔断热源，自然降温，待压力表指针回到零，打开排气阀，稍等一些时间，再开盖取物。
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实验13 微生物的纯系分离
1 了解土壤微生物的分离纯化及测数的基本原理。
2 学****并掌握微生物分离纯化技术方法。
3 学****并掌握微生物平板菌落计数的技术方法。
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二、基本原理
土壤是微生物生活的大本营，其中含有大量不同类型的微生物，可按照一定的方法将各类微生物通过分离进行纯培养，并能对特定类群进行数量测定。
基本原理是通过稀释使菌体细胞充分分散，单细胞得以生长发育形成菌落，可使用稀释法或平板划线法进一步纯化，还可通过平板菌落计数，推算单位重量土壤样品含有微生物的数量。
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图14-1 从土壤中分离微生物操作过程
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三、实验步骤
土壤样品采