文档介绍：***红(MR)试验/VP试验
.原理  细菌分解培养基中的葡萄糖产酸,当产酸量大,使培养基
的pH降至4。5以下时,加入***红指示剂而变红E***(红色)~pH (黄色)),此为***红试验。当细菌发酵葡萄糖产生***酸,***酸再变为乙酰***甲醇;乙酰***甲醇又变成2,3—丁二烯醇,2,3—丁二烯醇在碱性条件下氧化成为二乙酰,二乙酰和蛋白胨中精氨酸胍基起作用产生粉红色的化合物,此为VP试验。这两个试验密切相关,对一种细菌而言,两者只能居其一
.培养基及试剂
  葡萄糖蛋白胨水溶液。
***红试剂:  ***,95%酒精60mL,蒸馏水40ral。
VP试剂:  甲液、:a—萘酚酒精溶液(o—萘酚5g,无水乙醇100mL)。乙液:KOH溶液(KOH40g,水l00mL)o将甲液和乙液分别装于棕色瓶中,于4~10C保存。或:硫酸铜1g,浓氨水40mL,10%KOH950mL,蒸馏水10mLo
MR试验方法  取一种细菌的24h培养物,接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中,置37C培养48~72h,取出后加***红试剂3~5滴,凡培养液呈红色者为阳性,以‘‘十”表示;橙色者为可疑,以“±”表示;黄色者为阴性,以“―”表示。
VP试验方法  取一种细菌的•24h纯培养物,接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中,置37'C培养48~,再加乙液 ,充分混匀。静置在试管架上,15min后培养液呈红色者为阳性,以“+”表示;不变色为阴性,以“—”表示。1h后可出现假阳性。或者可以用等量的硫酸铜试剂于培养液中混合,静置,强阳性者约5min后就可产生粉红色反应。 
硫化氢试验
原理  细菌分解含硫氨基酸,产生HS,与培养基中的醋酸铅或FeS04发生反应,形成黑色的硫化铅或硫化亚铁。
培养基  可用成品微量发酵管、醋酸铅琼脂或三糖铁琼脂斜
面。
微量法  取一种细菌纯培养物,接种于H2S微量发酵管中,置
37℃培养24h 后观察结果。培养液呈黑色者为阳性,以“+”
表示,无色者为阴性,以“—”表示。
 常量法  用接种针蘸取纯培养物,沿试管壁作穿刺醋酸铅琼脂
或三糖铁培养基,37℃培养24—48h或更长时间,培养基变黑者为阳性。或将纯培养物接种于肉汤,肝浸汤琼脂斜面或血清葡萄糖琼脂斜面,(浸有饱和醋酸铅溶液*),培养于37℃,观察纸条变黑者为阳性。
氧化型与发酵型(O/F)的测定
原理  不同细菌对不同的糖分解能力及代谢产物不同,这种能力因是否有氧气的存在而异,有氧条件下称为氧化,无氧条件下称为发酵。这在区别微球菌与葡萄球菌、肠杆菌科成员中尤其有意义。
培养基  蛋白胨2g,***化钠5g,,葡萄糖10g,琼脂3g,1%溴麝香草酚蓝3mL,蒸馏水1000mLo将蛋白胨、盐、琼脂和水混合,加热溶解,,然后加葡萄糖和指示剂,加热溶解;分装试管,3~4mL僧;115'C,高压蒸汽灭菌20min,取出后冷却成琼脂柱。
试验方法  挑取18~24h的幼龄斜面培养物,穿刺接种,每种细菌接种两管,于其中l管覆盖lmL灭菌的液体石蜡,37C培养48h或更长时间,最长可达7d。
结果