文档介绍：高分辨率溶解曲线
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内容提示
高分辨熔解曲线（High Resolution MeltinTm值范围： 70-88 ℃
优点：不需要探针，直接利用PCR产物针对已知突变位点进行基因分型
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为何要使用温度内标
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A>T SNP without Calibration – 72bp
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Apply Temperature Calibration
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A>T SNP with Calibration
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Small Amplicon Genotyping
等对北京油鸡A-FABP基因进行小片段法基因分型，扩增片段为56bp，灰色曲线显示的是杂合型（CT），蓝颜色和红颜色曲线分别代表纯合型CC和TT。
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内容提示
高分辨熔解曲线（High Resolution Melting）的定义
高分辨熔解曲线在蚕的遗传育种中的应用
— 筛查突变（mutation scanning）
— 基因分型（Mutation Genotyping）
—小片段+内标法（ Small Amplicon Genotyping ）
—非标记探针法（Unlabeled Probe Genotyping，LunaProbe）
—SSR分析
— 检测***化
HRM仪器
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HRM – Lunaprobe genotyping
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HRM – Lunaprobe genotyping
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1 Probe – 1 SNP, All Possible SNPs
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1 Probe – 1 SNP, All Possible SNPs
Class 1 C:T, G:A
Class 2 C:A, G:T
Class 3 C:G
Class 4 A:T
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1 Probe, 2 SNPs, 1 Amplicon
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2 Probes, 2 SNPs, 1 Amplicon- ApoE
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2 Probes, 2 SNPs, 2 Amplicons - HFE
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Amplicon Scanning – 发现新的突变
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David De ，Yong Song at og high-resolution DNA melting for genotyping and variant scanning of diploid and autotetraploid potato Mol Breeding (2010)
25:67–90
rr
RR
Rr
Mix Rr:rr by 1:1 Rrrr
Mix RR:Rr by 1:1 RRRr
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内容提示
高分辨熔解曲线（High Resolution Melting）的定义
高分辨熔解曲线在蚕的遗传育种中的应用
— 筛查突变（mutation scanning）
— 基因分型（Mutation Genotyping）
—小片段+内标法（ Small Amp