文档介绍：PCR-STR法亲子鉴定
一、亲子鉴定定义
二、原始的亲子鉴定方法
三、现代的亲子鉴定方法
一、亲子鉴定的定义
亲子鉴定就是利用医学、生物学和遗传学的理论和技术，子代和亲代的形态构造或生理机能方面的相似特点，分核心序列组成，通常重复15-60 次，片段大小一般为100-300 bp。
STR主要由于核心序列的重复次数不同而具有高度多态性，是个体的特征，遵循孟德尔共显性遗传规律传递,绝大多数不受选择压力的影响，且较均匀地分布人类全基因组。
（２）STR的产生机制
微卫星DNA重复顺序的产生则普遍认为是DNA复制过程中滑动，或DNA复制和修复时滑动链与互补链碱基错配，导致一个或几个重复单位的插入或缺失。微卫星DNA自发突变率仅10－4～10－5，且核心序列越小，突变率越低。
（３）STR多态性
因为STR具有高度的多态性，所以能广泛应用于法医学实践。STR的多态性一般是指由于核心序列重复次数不同而构成的长度多态性，而长度多态性检测已被广泛应用于法医学个人识别和亲权鉴定。
（4）理想的STR基因座
从实用价值考虑，用于法医DNA分型的理想STR基因座应具备以下特点：
① 等位基因片段长度在95bp--5OObp范围，最好在400bp以下；
② 具有较高的杂合度及个人识别能力，，DP>；
③ 具有规律的四核苷酸或五核苷酸重复序列，阴影带出现率较低，较少或没有插入等位基因；
④ 等位基因数为10～12个，等位基因易于区分；
⑤ 突变率低，；
⑥ 具有高度种属特异性。
PCR-STR起源
进入20世纪90年代，Mullis和Saiki等学者发明并改进的PCR 技术被用于法医DNA 分析，从而建立了以PCR为基础的第二代DNA 分型技术。
利用STR-PCR分型技术，可将人类遗传信息数字化，根据孟德尔遗传定律，子女的遗传信息来源其生物学意义上的父亲、母亲。通过人类遗传基因分析和现代化DNA检测技术可以确定父母和子女是否具有血缘关系。在亲子关系的鉴定上，%以上水平。
2. PCR-STR法的理论基础与原理
理论基础
人类基因组是一个结构十分稳定的体系，同时又是一个变异的体系。在长期的进化过程中，基因组DNA的序列不断发生变异。这些变异有些被保存下来，导致了不同种族、群体和个体间基因组的差异和多态性。
除同卵双生子外，没有两个个体基因组是完全相同的。尽管遗传多态性的存在，但每一个人的染色体必然也只能来自其父母，这就是DNA亲子鉴定的理论基础
亲子鉴定是根据人类遗传学的理论和实践，从子代和亲代的形态构造或生理机能方面的相似特点，分析遗传特征，对可疑的父与子或母与子之间的亲生关系进行判断，并作出肯定或否定的结论。
原理
不同个体中，STR核心序列的重复次数不同。根据子代的两条DNA一条来自于父方一条来自于母方，其子代某一特定DNA分子上STR核心序列重复次数必定与父母相同。
根据微卫星DNA两端序列的保守性，设计一对特异引物，利用PCR技术，扩增每个位点的微卫星DNA序列，以检测、分析微卫星序列多态性；并确定基因排布序列及表型，最终达到成功鉴定的目的。
以上述原则为依据，美国联邦调查局(FBI)推荐用于建设国家DNA 数据库(combined DNA in—dex system，C0DIS)的13个STR 基因座，作为PCR—STR 的常用检测基因座，也成为目前法医STR分型的基础位点。
即D3S1358、THO1、
D21S11、D18S51、
D5S818、D13S317、
D7S820、D16S539、
CSF1PO、VWA、
D8S1179、TPOX、FGA.
5 . PCR-STR法方法步骤
样本的选择
DNA检测样本很多。一般来说，人体的任何组织或分泌物都可以做。
DNA样品收集主要采用抽少量静脉血或者末梢血或者收集口腔上皮细胞。此外，我们也可以进行头发、组织、血迹、胎儿的绒毛等特殊样本的DNA鉴定。
方法一：DNA测序法步骤：
①材料处理破碎细胞壁以释放细胞内容物破坏细胞膜使DNA释放到提取缓冲液中DNA释放后，尽量确保DNA的完整性
②分离纯化（去除杂质包括大量的RNA、蛋白质、多糖、单宁和色素等）
③SSR（Simple Sequence Repeat）引物设计根据CMD(Cotton Marker Database)已公布的序列来设计相对SSR引物。
④PCR扩增
⑤琼脂糖凝胶电泳
⑥挖胶
⑦回收试剂