文档介绍：交错配血(凝集***法)
原理
凝集***(polymatching)法第一利用低离子介质降低溶液的离子强度,减少红细胞四周的阳离子云,促使血清(浆)中的抗体与红细胞相应抗原联合,再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝集***溶液,中和红细胞表面的负
交错配血(凝集***法)
原理
凝集***(polymatching)法第一利用低离子介质降低溶液的离子强度,减少红细胞四周的阳离子云,促使血清(浆)中的抗体与红细胞相应抗原联合,再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝集***溶液,中和红细胞表面的负电荷,缩短细胞间距,形成可逆的非特异性齐集,并使IgG型抗体直接
凝集红细胞。加入中和液后,仅由凝集***惹起的非特异性齐集,会因电荷中和而分别,而由抗体介导的特异性凝集则不会分别。
标本收集:
标本种类:抽取静脉血3-4ml待凝结后分别血清,将细胞配成5%盐水悬液将供血者血样以相同方法分别血清(浆)和红细胞悬液。
标本要求:抗凝和干燥管均可,如用抗凝血主张用EDTAK2(mg/dz)抗凝标本应无溶血,切标签齐备。
标本储藏:急诊标本30分钟内达成操作,标本应至4℃
冰箱保存7天。
标本运输:室温运输。
标本拒收标准:细菌污染。溶血标本,标签不齐备不可以作测定。
试剂:
试剂名称:凝集***试剂(polymatching)
试剂生产厂家:(台资)珠海贝索生物技术有限企业。试剂构成:
(LowLonicMedium,LIM).试剂翻开使用后,可置室温储存,未开封者2-25度储存,有效期为2年。
***溶液(PolybreneSolution).
期同上。
(ResuspendingSolution).
期同上。
试剂4.%生理盐水。
仪器:
储存及有效
储存及有效
血型血清离心计:80-2型离心计江苏金坛市大地自动仪器厂
离心计:江苏金坛市大地自动仪器厂
电热恒温水箱:江苏金坛市医疗器材厂
显微镜:XSZ-H3(中国)
操作步骤及结果判断:
供受者红细胞用生理盐水配成3-5%的细胞悬液。加样量均
为:血清2滴,红细胞悬液1滴。主管:受血者血清+供者红细胞悬液;次管:受者红细胞悬液+供者血清;(阴阳比较管另设)。
各管分别加低离子介质混匀置室温1分钟。加凝集***溶液2滴,混匀,置室温15秒。
1000g(3400rpm),离心10秒,弃上清液,管底保存约液体。轻摇
试管,目测红细胞有无凝集。如无凝集,则重做前面试验。加入2滴重悬液,轻轻混淆,肉眼或显微镜下察看结果。凝块在1分钟内分别,试