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A型FMDV感染BHK-21细胞差异表达基因的筛选和初步分析.pdf

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A型FMDV感染BHK-21细胞差异表达基因的筛选和初步分析.pdf

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文档介绍

文档介绍:中国农业科学院向::农学硕士培养单位:兰州兽医研究所研究生院密级:论文编号:硕士研究生:杨双指导教师:马军武专业:预防兽医学研究方提交日期月·’:,
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导师签名。乡彳刎独创性声明研究生签名:布匆双关于论文使用授权的声明研究生签名:啼勃敢户¨时间:≯秒觐淘拢稳劢年翴如年占月加日同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不时间:
稂.\\易膨名胃至凑冀伽岛吲中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表兰州兽医研究所虵腥綛赴钜毂泶锘虻纳秆『统醪椒治研究方向指导教师培养单位芯克专业签名论文题目论文作者杨双预防兽医学马军武硕姓名职称单位导师评硕导口教授南京农业大学阅博导口√人研究员上海兽医研究所答辩甘肃省动物疫病预防动物疫病预主席控制中心兰州大学生物学兰州理工大学分子生物学委博导口员会议记录厥林密论文答辩时间地点年日兰州兽医研究所综合楼五楼学术厅陈溥言硕导口√防黎家王鸣钢罗建勋生物学和分子免疫学陈兆国贺奋义刘在新兽医传染病及其病原列/
可以引起口蹄疫№⒉《锏闹饕V⒆词歉呷纫约霸诳凇⒈恰⑻愫湍感笕橥肺廾ú课环摘要基因的表达存在一定的相关性和差异,本研究通过虵餍卸局⒑鳎疌/虯蹄疫病毒重组毒株感染赴蠡竦昧醪钜毂泶锘颍髦錾系鞅泶锘口蹄疫病毒是对偶蹄类家畜如牛、绵羊、山羊和猪等影响最为严重的病毒之一,形成水疱。口蹄疫病毒除了具有感染性和致病力强、潜伏期短、发病急,可通过含毒空气传播等特点外,最重要的特点是病原变异性强、具有准种特征,因此,给该病的控制和消灭增加了难度。如果没有得到快速有效的控制,易感动物就会将传播给野生动物。表达谱芯片是基因芯片的一种,它可以从整体上分析细胞表达情况,通过比较不同个体或物种之间以及同一个体在不同生长发育阶段以及正常和疾病状态下基因转录和其表达的差异,寻找和发现新的基因,并研究它们在生物体发育、遗传、进化等过程中的功能;表达谱芯片可为研究基因调控网络及机理,揭示不同层次多基因协同作用的生命过程提供手段,将在研究许多重大疾病的相关基因及作用机理方面发挥巨大作用。疾病的发生与发展往往伴随着基因表达模式的改变,正常宿主基因的表达和感染病原后宿主型重组毒株分别感染赴擞冒个转录体,,对感染后和这两个时间点的细胞的总辛俗B甲楸冉戏治觥2捎胷倍的标准筛选差异表达基因,结果显示型流行毒株感染赴鹟蠡竦昧霾钜毂泶锘颍渲錾系鞅泶锘和个下调表达基因;感染后获得了霾钜毂泶锘颍渲錾系鞅泶锘蚝下调表达基因。其中上调表达的基因主要有组蛋白家族、缝隙连接蛋白、馨拖赴疤寤颉凋亡诱导因子等,下调表达的基因有真核翻译起始因子、泛素结合酶、核糖体蛋白等。而涂和个下调表达基因;感染后获得了霾钜毂泶锘颍渲个上调表达基因和个下调表达基因。其中,上调表达的基因主要有家族、缝隙连接蛋白、凋亡诱导因子等,下调表达的基因主要有动力蛋白、核糖体核蛋白、核糖体蛋白等。实时定量际跬ü齈反应产物逐渐累积,使荧光信号强度等比例增加来实时监控扩增产物。实时定量司哂衅胀≒的优点外,还能对样品进行定量,减少污染,从而扩展了际醯挠τ梅冻耄且幌罹哂谢贝庖宓男录际酢1狙芯坑檬凳庇ü舛縋技术验证了目标基因、、虲诳谔阋卟《,变化趋势与芯片结果基本一致,证实了芯片结果的可靠性。本研究成功建立了涂谔阋卟《,并筛选出了差异表达的基因,在此基础上利用荧光定量际踅徊窖橹ち诵酒峁目煽啃裕源宋F台可以进一步探讨口蹄疫病毒感染赴⒉〉姆肿踊疲钥谔阋叩脑缙谡锒暇哂兄匾<值。关键词:虵珺.,表达谱芯片,实时定量
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录目土餍蠪局Ⅳ/℃乩们感染细胞⋯⋯⋯⋯~/气/餍卸局旰椭刈槎局旮腥鞠赴牟钜毂第一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯研究目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。国内外研究现状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

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