文档介绍：:
●●.
学位论文作者:力呻毫诜日期:圳年‘月矿日学位论文作者:力识镌学位论文使用授权声明原创性声明日期:沙甓嘣聐日歹本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。一
、∥●—呵弋●,
中文摘要≤鸡传染性法氏囊病琁怯杉Φ拇拘苑ㄊ囊病毒琁引起的传染性免疫疾病。鸡的法氏囊是该病毒侵染的靶器官,主要是膜表面可以表达的法氏囊前巴细胞。研究表明,九轻链是感染法氏囊细胞时的一个重要结合位点。但九轻链基因在感染鸡法氏囊细胞的过程中的分子机制还需要进一步的探究。为了深入研究九轻链基因在感染鸡法氏囊细胞中的基因功能,本研究利用技术设计了一个可以特异性抑制九轻链基因表达的表达载体一=ǜ迷靥遄H綝细胞和细胞,利用流式细胞术和等技术鉴定了九轻链基因的表达情况;,在分析了九轻链的基因序列后,,将启动子改变为鸡源的启动子形成用于驱动新霉素抗性基因表达;同时装入增强型绿色荧光蛋白基因表达框以及用于启动B嫉启动子,构建了一个具有绿色荧光标记和新霉素抗性,同时可以靶向干扰九轻链基因表达的共表达载体一8迷靥宀唤隹梢杂美标记和追踪被转染的阳性细胞,而且还可以用于持续转录幕虺聊定细胞系的筛选。流式细胞术、等结果显示:同对照组细胞相比,,九轻链基因的表达受到抑制,并且该细胞与的结合率也明显降低。这说明一泶镌靥蹇梢栽贒赴谔匾煨缘母扇臩徘崃椿虻表达。,对其进行扩大培养和功能性鉴定,实验结果显示得到的单克隆细胞经过多次的传代后,.靥迦匀能够持续表达并对九轻链基因的表达进行特异性的抑制。结果表明我们构々
建的一脖泶镌靥宓腞Ч歉咝У摹本实验利用技术成功获得了九轻链基因持续沉默的单克隆细胞株,通过实验进一步证实了九轻链是与细胞的一个重要结合位点,九轻链基因的表达与否可以影响与细胞的结合能力。这为进一步探索感染法氏囊细胞的分子机制及感染过程奠定了基础,也为鸡传染性法氏囊病的预防、控制和治疗提供了理论支持。关键词:;九轻链;;启动子中文摘要一
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!R毒渺善≮,矿瓸籶,....,琤,、Ⅳ甋
.;;餐.;.舕甌—,
第二章靶向九轻链的驛靥宓墓菇ḿ捌溆行约ā蔫目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.目录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..调节基因表达的有力工具——扇偶际酢病原学⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.基因组⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.的病毒蛋白及其生物学功能⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..繁殖过程及致病机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯受体的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯本研究的目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..载体的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.:⋯⋯⋯⋯⋯⋯..结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..载体的鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一行О械愕脑げ饧澳鼙泶锵嘤的重组载体的快速鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.籼.
第三章九轻链瞬时沉默的驛Ч觳狻第四章九轻链稳定沉默的效果检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯