文档介绍：中国农业科学院学位论文华北大黑鳃金龟气味结合蛋白功能分析月密级:论文编号:硕士研究生:指导教师:申请学位类别:邓思思李克斌副研究员农学硕士专业:农业昆虫与害虫防治研究方向:昆虫化学生态与分子生物学培养单位:植物保护研究所研究生院提交日期篠
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:瓴卧隆緂日本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。论文作者签名:导师签名:时间:知、月●
摘要自然界中,昆虫个体之间、昆虫与环境之间的顺利交流是维持这些物种生存与发展的重要原因之一,而昆虫灵敏的嗅觉在其中又起到了关键的作用。借助嗅觉系统昆虫能够定位寄主、配偶,躲避天敌的捕捉以及避免有毒物质,触角作为感受外界环境的直接器官成为嗅觉系统中不可或缺的一部分,其中的各种有功能的蛋白则是维持正常嗅觉的基础。华北大黑鳃金龟是我国北方的一种重要的地下害虫,其广泛的寄主植物和隐蔽的生活环境导致防控困难,对农业生产、生活造成了严重的破坏。为了能更好的增进对华北大黑鳃金龟嗅觉机制的认识,以科学、绿色的方法对其进行调控、防治,我们通过分子生物学手段获得了华北大黑鳃的两种气味结合蛋白,并对其功能进行了研究,同时进行了电生理学和行为学方面的试验从宏观角度了解这两种蛋白可能的作用。主要研究成果如下:ü齊际趸竦昧肆教趸1贝蠛谌鸸昶督岷系鞍谆蛉ǔぃ⒃贕中登录,登录号为:,。通过生物信息学方法对其序列进行分析,研究了它们与其他鞘翅目昆虫和其他目昆虫和气味结合蛋白的亲缘关系。泶锎炕薕蚈诤系鞍祝⑼ü刈槌っ盖谐吮泶锉昵Müü竞争结合试验,利用Sü馓秸胙芯苛怂嵌制斗肿拥慕岷夏芰Α=峁允荆篛与能够较为广泛的结合植物挥发物,但是对信息素化合物结合能力有限。其中,花香类化合物肛紫罗兰***在本结合试验中是两个气味结合蛋白最好的配体。对能够引起华北大黑鳃金龟强烈趋性的蓖麻的部分挥发物有较强的结合能力。对能引起引诱其他种类金龟子的丁子香酚有好的结合能力,对常见植物挥发物水杨酸甲酯亲和力也很强。另外,我们发现两个气味结合蛋白的结合能力还与气味化合物的构象、所带基团和侧链上碳原子个数有密切的关系。∪×瞬糠纸岷夏芰虾玫幕衔锖统<闹参锘臃⑽锒曰1贝蠛谌鸸杲械缟学试验,再测试它们对其中能引起较高档男形QХ从Α=、芳樟醇、、捍肌⒘诎被郊姿峒柞ァ⑺钏峒柞ザ曰1贝蠛谌鸸甑奈芰Χ枷灾高于对照正己烷,但辛醛和苯乙醇对华北大黑鳃金龟的吸引作用低于对照正己烷。结合荧光竞争结果来看,和分别对能引起较高岛拖灾形7从Φ牟糠种参锘臃⑽镉辛己的亲和性,如水杨酸甲酯、芳樟醇等。同时,我们发现有些物质能引起华北大黑鳃触角较高值却不能与两个蛋白结合或者结合能力很弱。我们推测,这可能是有更多种的不同功能的存在于华北大黑鳃金龟基因组中,通过在嗅觉系统中分工合作来实现对各种气味的反应。么炕⑷コ鼿的蛋白免疫家兔,获得了和的多克隆抗体。通过免疫电镜试验观察两个气味结合蛋白在触角感器中的分布情况。结果显示,两个气味结合蛋白抗体均能标记雌雄华北大黑鳃金龟触角中的主要感器板型感器和锥形感器。关键词:华北大黑鳃金龟,气味结合蛋白,荧光竞争结合试验,触角电位图,免疫化学定位
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目录第一章引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯昆虫的触角感器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.