文档介绍：中国农业科学院学位论文大丽轮枝菌迦胪槐涮蹇獾墓建及致病相关基因的筛选硕士研究生:汪佳妮指导教师:戴小枫研究员申请学位类别:理学硕士业:生物化学与分子生物学研究方向:棉花抗病分子生物学培养单位:作物科学研究所研究生院密级:论文编号:专提交日期月—
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翮虢戏小\帆叫年/月矽日研究生签名:乡王彳生妮江彳至妮关于论文使用授权的声明独创性声明上。,,年多月力日≯辍卧氯腥本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。时间:本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名:
似,宦怨\\.筛够黝旌充马鸯祥彬垢氏垅一糊岁垫中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表博导日博导∥研究方向职称位论文题目论文作者专业指导教师培养单位芯克硕姓名单签名导师博导凹大丽轮枝菌迦胪槐涮蹇獾墓菇ḿ爸虏∠喙鼗虻纳秆生物化学与分棉花抗病分子汪佳妮子生物学戴小枫作物科学研究所评博导鹄朱玉贤教授北京大学生命科学学院阅人赵开军研宄员作物科学研宄所答清华大学生物化学与分子生物学研究所刘进元席李毅硕导口/河南省农业科学院植物马奇祥研究员保护研究所黄荣峰博导生物技术研究所辩黄三文硕导口,委蔬菜花卉研究所简桂良员植物保护研究所硕导口/’路文如农业信息研究所会议记录厥论文答辩时间地点生物学主月日中国农业科学院作物科学研究所育种楼—一,
〉牟≡=昀矗莆≡谖夜北方棉区发展蔓延迅速,危害也在逐年加重,已成为当前制约我国棉花生产的突出问题。常规育种方法和其它防治方法如物理化学方法等在黄萎病的防治中收效甚微。目前对大丽轮枝菌的致病机理知之甚少,且缺乏可资利用的高抗抗源材料,因此,对于棉花黄萎病的研究应不仅仅包括挖掘高抗抗源材料和选育抗病品种,还应找出大丽轮枝菌关键的致病相关基因。本研究通过插入突变与功能基因鉴定等方法,构建大丽轮枝菌婊迦胪槐涮蹇猓秆∮爰定闹虏∠喙鼗颍荚谖Q芯看罄雎种虏》肿踊砗兔藁ɑ莆〉姆乐翁峁├砺垡据和手段。构建了含有构巢曲霉启动子和潮霉素基因的真菌表达载体,利用农杆菌介导的真菌遗传转化体系将上的H隫的基因组中,得到鯲随机插入突变体。对其中株突变体在不同碳源培养基上的生长能力、产孢能力和在不同类型棉种中致病力的差异等表型特征进行鉴定,并对迦胛坏悴嘁硇蛄薪蟹治觯峁砻鳎甌插入突变会导致突变体在不同碳源培养基上的生长能力发生改变。从突变体在⒉楸瓤恕⑾宋兀楸瓤纤维素为唯一碳源凸海楸瓤果胶为唯一碳源嘌上生长的结果可以看出:与野生型啾龋槐涮在查比克培养基上生长速率下降;在以纤维素和果胶为唯一碳源的培养基上的生长速率下降。甌插入突变会导致突变体的产孢能力发生改变。与野生型啾龋槐涮、、和诓楸瓤艘禾迮嘌械牟吣芰γ飨韵陆怠甌插入突变会导致突变体的致病力发生改变。与野生型啾龋糠直徊馔槐体的致病力明显下降;槐涮、、、—、对感病棉种冀的致病力明显下降,低于野生型虏×Φ/槐涮、、、、、和阅筒∶拗衷闹虏×γ飨韵陆担陀谝吧蚔致病力的:槐涮、、、、、对抗病棉种鲁的致病力明显下降,低于野生型虏×Φ/槐涮、、.对不同参试棉花品种的致病力均由强变弱,圆煌问悦藁ㄆ分值闹虏×汕勘渲小甴ǹ捎糜诖罄雎种鶷插入位点侧翼序列的分离,并通过该法扩增得到个突变体迦胛坏愦Φ牟嘁硇蛄校怯隫基因组的序列进行比对,得到株突变体的迦胛坏恪关键词:大丽轮枝菌,农杆菌介导的真菌遗传转化,迦胪槐洌硇图ǎ虏×
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目录第一章绪论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯黄萎病⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...莆【.莆》⒉√卣鳌大丽轮枝菌致病机理研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯...罄雎种虏』》肿踊怼农杆菌介导的真菌遗传转化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..痴婢糯;际酢.└司榈嫉恼婢糯;⒖寺∠喙鼗颉本研究的实验目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.第二章大丽轮枝菌遗传转化双元载体的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯