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GB/T182044-2000
、八、•
前言
为贯彻执行《公共场所卫生管理条例》和GB9663〜9673-
1996、GB16153-1996《公共场所卫生标
准》,加强对公共场所卫生监督管理,特制定本标准。
本标准中的方法是与GB9663—9673-1996,GB16153-1996相配套的监测检验方法。
本标准第一法为xx。
本标准为首次发布。
本标准由XX卫生部提出。
本标准起草单位:
江苏省卫生防疫站、广东省卫生防疫站、天津市卫生防疫站、辽宁省卫生防疫站。
本标准主要起草人:
XXXX:
XX、XX、XX万双、XX玟、张淑兰;
戳印法:
姜淑荣、XX、XX、付亚书。
XX国家标准
公共场所XX、床上卧具微生物检验方法
细菌总数测定
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Methodsofmicrobiologicalexamination
fortowelandbedclothesinpublicplaces
-Determinationofaerobicbacterialcount
GB/-2000
范围
本标准规定了公共场所毛巾、床上卧具细菌总数的测定方法。
本标准适用于公共场所内公用毛巾、床上卧具细菌总数的测定.
引用标准
下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本
标准出版时,所示版本均
为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最
新版本的可能性。
GB/-2000公共场所茶具微生物检验方法细菌总数测定
定义
本标准采用下列定义。
细菌总数aerobicbacterialcount
指被检物品经过采样处理,在一定条件下培养后(培养基成分、培养温
度、培养时间、pH值、需氧性
质等).25cmA2表面上所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结
果,只包括一群在营养琼脂上
生长发育的嗜中温性需氧菌落总数。
细菌总数主要作为判定公用毛巾,床上卧具被污染程度的标志,检测细菌
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总数,为公用毛巾、床上卧具清洗消毒效果的判定和评价提供依据。
第一xxxxxx
仪器
见GB/-2000中第4章。
培养基和试剂
见GB/T18204,2-2000中第5章。
检验程序
见GB/-2000中第6章。
国家质量技术监督局2000-09-30批准
2001-01-01实施
GB/T18204,4-2000
操作步骤
7-1采样方法
随机抽取清洗消毒后准备使用的毛巾、床上卧具。
用灭菌生理盐水湿润棉拭子,在毛巾、枕巾对折后两面的中央各25cm2(5cmx5cm)面积范围;床单、被单在上下两部各25cmA2面积范围内有顺序地来回涂抹,用灭菌剪刀剪去棉签手接触的部分,将棉拭子放人10mL生理盐水内,4h内送检。
检验方法
-1将放有棉拭子的试管充分振播。此液为1:10稀释液。
,吸取2mL检样,分别注入到两块灭菌平皿内,每皿1mL。如污染严重,可十倍递增稀释,即吸取1mL加到9mL灭菌生理盐水中,混匀,此液为1:1OO稀释液。
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每个稀释度做两块平皿。
°C左右的营养琼脂培养基倾人平皿,每皿约15mL,并立即旋摇平皿。
xx后
放36C土1C培养箱培养48h。
菌落计数方法
作平皿菌落计数时,可用肉眼直接观察,必要时用放大镜检查以防遗漏,在记下各平皿的菌落数后,
求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落,该平皿不宜计数;若片状菌不
到平皿中的一半,而其余一半中菌落分布均匀,则可将此半个平皿菌落计数后乘以2,所得结果代表全皿菌落数。
公用XX、床上卧具细菌总数按公式
(1)计算:
m=k*n/2
m---细菌总数,cfu/25cmA2
k—稀释倍数
n—平均菌落数
菌落数报告方式
见GB/-2000中第9章。
第二法戳印法
原理
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,注入营养琼脂培养基,使其表面比皿边高2〜3mm。
采样时将
培养基表面和被检物品表面吻合,轻轻按压3--4s,使其被检查物体表面能够均匀地与培养基表面接
触。然后盖上皿盖,置恒温箱37°C培养24h后,计数培养基表面(10cm2)生长的细菌菌落数。
”培养基和试剂
营养xx培养基
成分:
蛋白胨10g
牛肉膏3g
氯化钠5g
xx15〜20g
蒸馏水1000ml
制法:
将上述成分混合后,加热溶解,调pH为74-,过滤、分装于玻璃容器中,经121C灭菌20min,储存于冷暗处备用。
12仪器
12-1高压蒸汽灭菌器.
干热灭菌器。
恒温箱。
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。
().
。
13检验步骤
〜55°C的营养琼脂培养基,倾注于已灭菌的特制戳印平皿内(使皿内部培养基
平面比皿边缘高2〜3mm),每皿约10mL,待凝固后,盖上皿盖(皿盖与培养基隔一定空间),翻转平皿,
在4C下保存备用。
,再将皿盏打开,放在被检物品表面上,用手轻轻按压3〜4s,取下,盖上皿盖,置
37C恒温箱内,培养24h后观察结果,计数细菌菌落数。
14结果计算
用肉眼观察,点数培养基表面菌落数,其细菌总数为10cmA2(每皿)表面积的菌落数。
本法简便易行、可靠,可直接采样做细菌培养。