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言要旒万矽.∥墨勿论文作者签名:弗心象论文作者签名:林黎论文作者签名:杌熏物日期:圳月日期:动:年日海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明:原创性声明学位论文版权使用授权说明日期:曲暌自耮,日本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本人在导师指导下完成的论文成果,知识产权归属海南大学。保密论文在解密后遵守此规定。导师本人已经认真阅读“咝Q宦畚娜氖菘夥⒉颊鲁獭保饨ū救说难宦畚奶交“咝Q宦畚娜氖菘狻敝腥姆⒉迹⒖砂础罢鲁獭敝泄娑ㄏ硎芟喙厝ㄒ妗M意论文提交后滞后:口半年;口一年;.攴⒉肌日期、
到含有聊∥际踔刈榻油返个目的片段,利用妒技术,通过摘要香蕉条斑病毒珺且恢肿罱甘瓴欧⑾帧⒓ǖ植物病毒,是香蕉条斑病的病原物,属花椰菜花叶病毒科,杆状《臼簦目前,尚无有效的检测和防治方法。其基因组为双链环状笮左右,共有三个编码框,其中产物鞍和鞍功能尚不明确。本实验同时使用细菌双杂交系统和酵母双杂交系统,研究了香蕉条斑病毒自身编码的、屯饪堑癐兰涞南嗷プ饔茫妇咏幌低秤斩柿:土晕镏柿5墓菇ā⒆约せ钭饔眉觳饧八咏实验。构建,虲挠斩傲晕镏柿#钪胀ü咏皇匝槔初步鉴定三种蛋白质组分的互作情况。本实验设计了三对含有内切酶位点接头的特异性引物,通过姆椒ɡ┰龅玫饺瞿康幕蛐蛄校拗菩阅谇酶切割以及用噶雍蠼浞直鹆羛和载体上,获得重组诱饵和猎物质粒。庑蚪峁砻鳎个重组质粒中编码区的碱基序列和阅读框均正确。将重组质粒转化大肠杆菌瓸惺芴赴A瞬试以上质粒有无自激活现象,℃培养,观察菌落生长情况,期间以空及空柿9沧;蟪Ω司ǜ婢曜魑R跣远哉眨鄄炀渖で榭觯峁允荆个重组质粒均无自主活化现象,可用于下一步的文库筛选实验。将钟斩柿:至晕镏柿Mü煌楹稀⑴涠怨沧;=峁砻鳎疌琍珻疌榕涠跃哂星苛业幕プ鳎渌楹显蚪鲇形⑷趸作甚至无互作。湍杆咏幌低秤斩柿:土晕镏柿5墓菇ā⒆约せ钭饔眉觳饧八咏由于细菌双杂的一些局限性,为了进一步确证实验结果,本实验同时采用酵母双杂系统检验上述值鞍椎幕プ髑榭觥I杓铺匾煲铮ü齈扩增得和两步重组反应,将瞿康钠畏直鹬刈榈絧与瓸
质粒上,构建了瞿康钠蔚挠斩柿:土晕镏柿!=刈橹柿W;湍感受态细胞,并设置不同对照,验证种刈橹柿5淖约せ钕窒蟆=果表明,种刈橹柿>哂形⑷醯淖约せ钕窒螅庵肿约せ羁梢员浓度以下的瓵种疲士梢杂糜谙乱徊降乃咏皇匝椤=种诱饵质粒和至晕镏柿0凑詹煌楹稀⑴涠怨沧;湍窶惺芴赴ü掠的报告基因检测各种配对之间的互作现象。结果表明:疌琍/珻疌三组配对均具有强烈的互作,而其他组合则仅有微弱互作甚至无互作,以上结果完全符合细菌双杂的结果。关键词:香蕉条斑病毒;蛋白互作;细菌双杂交;酵母双杂交;Ⅱ
,诹鮐痠,,,—、析,.甤、蕊℃,,籅己,.,瓻疌琍/珻疌
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录目摘:⋯.⋯⋯..⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯.⋯.⋯⋯⋯⋯.⋯⋯.⋯.⋯.⋯.⋯⋯..⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯..⋯⋯⋯文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯憬短醢卟《镜母攀觥形态与致病症状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯株系与传播方式⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯蜃榻峁辜捌浔嗦氲鞍坠δ堋《旧芷谥械幕プ鞴叵怠病毒生命周期中自身组分间的互作关系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯病毒生命周期中自身组分与宿主蛋白间的互作关系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯芯康鞍谆プ鞯氖侄巍’酵母双杂交系统的原理、特点及应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.细菌双杂交系统的原理、特点及应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯狙芯康牧⑻庖谰荨研究目的及意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.主要研究内容⋯⋯⋯⋯:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯牧嫌胍瞧鳌材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。.妇咏幌低尘旰椭柿!’.湍杆咏幌低尘旰椭柿!.浮⒖固搴突约痢主要设备及仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.椒