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杜氏盐藻驱动蛋白-2亚基FLA8的基因克隆及功能分析.pdf

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杜氏盐藻驱动蛋白-2亚基FLA8的基因克隆及功能分析.pdf

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杜氏盐藻驱动蛋白-2亚基FLA8的基因克隆及功能分析.pdf

文档介绍

文档介绍::.一
学位论文作者:李俊手李俊乎:昕诨试氯鐌/年拶皇月细学位论文原创性声明学位论文使用授权声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者:根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,丽意学校保留或向圉家有关部门袋机构送交论文的复印件和电子版,允询:沦文被查阅和借阂:本人授权郑州大学越ū狙宦畚牡娜ú炕虿糠直嗳胗泄厥晨饨屑焖鳎梢圆捎糜坝缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人禽校后发表、使搠学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或戚粜时,第一鬻锡单位仍然为郑本人在导师指导瓿傻穆畚募熬瞎豧籎彩褡骶В猼产权烟桶郑州大学。州大学。保密论文在解密后应遵:捍斯娑ā;;期:
摘要杜氏盐藻驱动蛋白一腔鵉幕蚩寺〖肮δ芊治鞭毛是进化上非常保守的具有特殊功能的细胞器,在细胞运动、感知外界环境信号并向细胞内传递信号的过程中担任重要角色,其功能和运动性的改变可导致多种疾病,如多囊。肾、肥胖症、糖尿病、癌症等。鞭毛内的物质运输和组装是通过鞭毛内运输,来调控的,治4踊逖着轴丝向鞭毛顶部的正向运输和方向相反的逆向运输,,包括三个亚基:两个不同的动力亚基和一个非动力结合亚基。研究显示衣藻的一个动力亚基ㄎ辉诜至哑诘有丝分裂纺锤体中和分裂间期细胞的鞭毛轴丝外层微管和鞭毛膜之间,基因的突变可以使鞭毛重吸收受到阻碍,衣藻的另一个动力亚基与染色体缺失相关,但对鞭毛再生过程的影响未见报道。杜氏盐藻,畇是一种无细胞壁的单细胞真核绿藻,具有一对等长的鞭毛,长约,具有典型的峁埂O晕⒕迪录纯晒鄄斓其鞭毛长度和运动性的变化。本实验以杜氏盐藻为模式生物,以其鞭毛为研究对象,观察杜氏盐藻在鞭毛再生过程中的作用,为进一步研究在鞭毛组装过程中的作用及鞭毛内运输机制提供依据。本研究根据团藻、衣藻和小球藻等的蛋白的氨基酸保守序列蚇设计简并引物,采用、’技术扩增获得杜氏盐藻基因的全长序列。然后用机械法脱去杜氏盐藻鞭毛,在鞭毛再生过程中分别收集各时期的藻体,提取细胞总⒎醋B嫉玫礁魇逼的,通过在结构域中设计一对特异性引物,通过荧光定量治鯢蛟诙攀涎卧灞廾偕讨械淖饔谩克隆得到的杜氏盐藻基因全长序列为,序列分析显示其包括的疷、的疷以及的开放阅读框,编码个氨基酸残基,其蛋白质的理论等电点为肿恿课0被嵝列同源性分析显示其与其他物种有较高的同源性:团藻、衣藻、小
球藻等,说明克隆所得的序列为杜氏盐藻的基因序列。实时荧光定量峁允径攀涎卧錐水平在鞭毛再生过程中持续高表达,在鞭毛再生速度较快的前冢現谋泶锩飨愿哂谄渌奔涠巍1狙芯肯允杜氏盐藻基因的高表达在鞭毛再生过程中发挥重要作用。关键词:杜氏盐藻;基因;驱动蛋;鞭毛再生摘要
甌...—瓼瑂,甋..珼.,琣—’琽.:疪
畇甌%珻,.篋.,.,.—。瓵畇瑂,甊畉琭畇;;..疷,疷甀;琹駆駆駆縄
⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯攀涎卧錐虿糠中蛄械目寺材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.攀涎卧錐蛉ǔさ目寺〖捌湫蛄蟹治觥疪椒ɡ┰龆攀涎卧錐虻’端⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.峁疪┰龆攀涎卧錐薱材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯..牧嫌敕椒ā结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..
附录部分综述部分至疚絵⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯小结与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..个人简历硕士研究生期间发表的论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一‘.一