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花生耐低温种质筛选及相关差异表达基因鉴定摘要花生是世界重要的油料作物和经济作物,特别在广大发展中国家,是重要的食用植物油和食用蛋白源。温度是影响花生生长发育,限制花生种植地理分布的重要因素之一。筛选耐低温花生种质,并分离耐低温相关基因对于培育高产稳产的耐低温型花生品种,进一步提高花生单产,扩大花生种植面积,具有十分重要的意义。本研究首先利用份花生种子进行低温吸胀萌发试验,统计露白率及芽长/种长,筛选耐低温种质,并通过近红外光谱技术测定油酸、亚油酸、棕榈酸、脂肪、蛋白质及蔗糖含量,分析花生种子吸胀期间耐低温性与各项品质性状之间的相关性。结果表明:参试花生种质在低温胁迫条件下,露白率%的种质有份、%栋茁/%的种质有荨露白率≥%的种质有荨⒙栋率サ闹种视占总数.%、砍ぃ殖的种质有荨⒀砍ぃ殖的种质有份。其中,多粒型种质的耐低温性最强,露白率为%、芽长/种长为V肿拥穆栋茁视胙砍ぃ殖こ始灾喙亍⒂胫竞砍氏灾关,芽长/种长与亚油酸含量呈显著正相关、与油酸含量呈显著负相关,但这两项指标与百仁重相关性均不显著。将耐低温性最强的花生种质,分别进行嫖痛砗吞锛湔2ブ质钡温度℃进行吸胀处理,取吸胀,和幕ㄉ罚崛』ㄉ肿拥淖⒎掷胗氪炕痬捎肞菇个低温胁迫下的抑制差减杂交文库文库直鸨昙俏狝库、夂狻个文库分别随机挑选隹寺〗胁庑颍晒Σ庑虻奶跏直鹞,。经序列组装,饣竦个,其中鯿个饣竦鰑渲鯿个籆库获得鰑其中个和鰏。⑹停渲校珹库鰑有相关同源信息,鰑有相关同源信息,个邢喙赝葱畔ⅰ;蚬δ苤饕I婕暗阶B嫉骺亍⒛芰看弧⑿财确御、细胞结构、细胞保护、信号转导和生物合成等方面。从鑫目庵谢竦玫闹刈榭寺≈校荼榷院妥⑹偷慕峁粞×龈兴趣的基因,验证其在正常温度处理下和低温胁迫处理下,基因的差异表达情况。用荧光实时定量姆椒ń醒橹ぃ捎。丛姆椒ǎ扛龇从χ馗次取
长序列,它们是三翻咛シ⒂砥诜岣坏鞍基因、油质蛋白颉平均值。经验证,这个基因在娴臀滦财却硖跫碌谋泶锪渴嵌哉沾℃情况下的恫坏取选取鼍橹と肥涤胫参锬偷臀孪喙氐幕颍肦姆椒ɑ竦萌B家蜃右约癕转录因子。其中,蚴鞘状卧诨ㄉ戏掷氤隼础经序列分析发现,本实验中所克隆三序列长度为,编码霭被幔蛄谐ざ任,编码霭被幔籒序列长度为,编码霭被幔籑序列长度为,编码霭被帷2⒂蒙镄畔⒀软件分别预测了其编码蛋白的物理化学性质,功能结构域,活性位点以及二级、三级结构。这些工作为通过和畂方法对这些基因进行功能分析乃至通过分子育种手段培育花生耐低温品种奠定基础。关键词:花生;耐低温;抑制差减杂交文库;荧光定量徊钜毂泶
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