苯丙氨酸乙酯修饰海藻酸钠纳米粒的制备及应用.pdf

文档介绍：谨以此论文献我的导师和我的家人?一一一赵士睿苯丙氨酸乙酯修饰海藻酸钠纳米粒的制备及应用学位论文完成日期:指导教师签字:答辩委员会成员签字:独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得l逵!麴邃直墓丝壶薹挂型直塑的!奎拦亘窒2或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者沙J/年j月≯7日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,并同意以下事项:l、学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。2、学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中国学术期刊(光盘版)电子杂志社”KI《中国知识资源总库》,授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)??躲冬签字吼沙‘/年j月7日导师签字:多1驰签字日期:_聊年f月力7日Y1928090苯丙氨酸乙酯修饰海藻酸钠纳米粒的制备及应用摘要本论文以苯丙氨酸乙酯为疏水基团,(SA—PE,SP)耦合物,研究了这种两亲性分子在水溶液中的自组装行为;以维生素B2(VB2)为模式营养物制备了载药的海藻酸钠纳米粒(),研究了其在体外的药物缓释效果;,考察了纳米粒的细胞毒性,并探讨了细胞对纳米粒的摄取机制以及影响因素。利用EDC和NHS作为交联剂,通过酰胺键共价连接苯丙氨酸乙酯(L—Phenylalanineethylester,PE)到海藻酸钠(sodiumalginate,SA)上制备SP化学耦合物,并改变苯丙氨酸乙酯与海藻酸钠的反应摩尔比制成三种不同取代度的样品(SPI、SP2、SP3)。利用核磁共振和红外光谱检测证明了产物的结构;利用元素分析仪测定了产物的取代度,;通过超声法制备SP纳米粒悬液,利用动态激光散射、透射电子显微镜和荧光光谱技术对纳米粒的理化性质进行了测定,纳米粒的粒径随取代度增加而减小,—,纳米粒近似球形,形态完整;SP纳米粒的临界聚集浓度(CAC)随着取代度的升高而降低,SPI,SP2和SP3的CAC值分别是:、、。以VB2为模式营养物,利用超声法将VB2包被到纳米粒中,制备载药纳米粒(VB2一SP)。随着加药量的提高,SP纳米粒的包封率降低,载药量提高,-a:%;随着取代度的升高,包封率和载药量都有提高。,48h内SP纳米粒对VB2具有良好的缓释效果;VB2的释放量受取代度和pH的影响,取代度越高,缓释效果越好;,;SP纳米粒适合作为营养物质VB2的载体。利用MTT法测定不同取代度的空白SP纳米粒细胞毒性,并利用荧光酶标仪与激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)。结果表明,除了lmg/ml的SP3纳米粒,,24h后存活率仍在95%以上;细胞对纳米粒的摄取率受取代度、纳米粒浓度、孵育时间和温度的影响,在高取代度低浓度较长孵育时间条件下,细胞对纳米粒具有高的摄取率;4h内大约有60%;4℃下细胞对纳米粒的摄取受到抑制;。关键词:海藻酸钠;疏水修饰;Sp纳米粒;缓释;MTT;PreparatonandappcatonofnanopartCesbasedonphenyaanReethyestermodfedsodumagnateAbstractSodiumalginate(SA)-phenylalanineethylester(PE)conjugates(PE-SA,SP)werepreparedwithphenylalanineethylester(PE)-(VB2)waschosenasamodeldru