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ADC及非ADC病人HIV-1tat基因多样性分析及其对U87细胞分泌TNF-α与IL-1β的影响.pdf

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文档介绍

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赋蛤皆ū论文作者签名:蠡亟丛导师签名:壶函日期:.竺:茎:尘萤丛丛兰:兰:垮原创性声明关于学位论文使用授权的声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名:本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段C苈畚脑诮饷芎笥ψ袷卮斯娑期:保存论文和汇编本学位论文。日

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中文摘要胺茿病人蚨嘌苑治及其对赴置赥鲇隝猯挠跋硕士生:蒲双双专业:卫生检验导师:赵丽副教授目的艾滋病痴呆综合征荋侵犯中枢神经系统笠鸬囊种重要的神经系统并发症,其病变程度与大脑中氖坎⒉蛔苁窍喙兀病毒载量外姆⑸箍赡苡際本身的基因突变及生物学活性的改变有关。亲陨砀叨缺湟斓牟《荆秩隒后,赜械幕肪尘龆薍在械谋湟觳煌谕庵堋的反式激活因子梢杂盏蓟罨奘上赴和神经胶质细胞分泌各种细胞因子,引起神经元细胞的损伤,在姆⒉』制中发挥重要作用。为了探讨蛟贑和外周中的多样性以及这种多样性与涞墓叵担韭畚亩砸焕鼳病人和一例非∪薈和外周共霾课焕丛吹闔谝煌庀宰踊蛐蛄薪辛朔治觯⒀究了虮湟斓贾碌腡氨基酸位点的改变对赴置赥吨、.的影响,为探讨闹虏』啤⒃し篮椭瘟艫提供依据。方法⒁砸焕鼳病人和一例非∪送庵淋巴结、脾脏虲膜、额叶灰质、颞叶、基底核、额叶白质鞑课换蜃镈为模板,巢式扩增显子及邻近基因序列,锪拥絧寺≡靥后转化大肠杆菌,经氨苄青霉素及蓝白斑筛选出阳性菌落,每个部位选取鯤寺〗胁庑颍褂肂、癏核酸序列库中的在线软件,对两例病人不同部位来源的蛄蟹直鸾邢低撤⒂鳌⒒因距离、同义替换/非同义替换比值痙戎及氨基酸位点分析。⒏菪蛄蟹治鼋峁颐茄∪×嚼∪送庵芷⒃嗪椭惺嗷缀瞬课焕丛吹寺「饕恢共,┰龀鰐第一外显子基因,与甌山东大学硕士学位论文■
克隆载体连接后转化大肠杆菌缸,氨苄青霉素及蓝白斑筛选出阳性菌落,并用双酶切鉴定和测序证实。双酶切回收的谝煌庀宰踊蛴刖盖械逆转录病毒表达载体瓽樱;螅避星嗝顾厣秆出刈槟孀B疾《颈泶镌靥澹盟盖屑ㄖな怠H缓蠼玀重组逆转录病毒表达载体与沧H赴ü庀晕⒕下观察逆转录病毒包装情况。收获细胞上清液,经逐孔稀释法测定逆转录病毒感染滴度,然后以相同滴度病毒感染赴ü庀晕⒕导觳庵刈槟孀录病毒蛋白表达情况,ú舛║细胞上清中Γ產、.的含量,⒊晒寺×艘焕鼳病人和一例非∪送庵芎虲共霾课来源的株颍庑駼分析证实均为蛐蛄小系统进化树可见,∪瞬煌课焕丛吹膖基因大多位于各自的进化枝上,少数存在交叉现象,说明∪死丛磘基因变异过程中受到明显区室化作用影响;非∪瞬煌课焕丛吹膖基因交叉在一起,说明非∪死丛虮湟旃讨惺芮一饔糜跋旖闲⒒蚓嗬敕治鼋峁砻鳎M庵芑蛲狢来源的蛄屑浠蚓离较小,而外周和膖序列间基因距离较大,并且同一例病人外周列总比蛄斜湟齑笠恍纱丝杉《咀陨肀湟焱猓珻和外周不同的机体环境对基因变异也具有一定的选择作用。另外,∪送庵芎虲序列与曜夹蛄屑涞幕蚓嗬氩钜煊邢灾,∪烁腥镜牟《静煌⒉”溲现爻潭炔煌盎的免疫功能不同都会对幕虮湟觳跋臁在进化过程中受到自身变异和环境选择的双重作用,/值是估计分子进化机制的重要参数。∪怂蠬蛐蛄衐痙庵芾丛碒蛐蛄衐痙.,中枢神经系统来源蛐蛄衐痙.:非∪怂蠬蛐蛄/.庵芾丛碒蛐蛄衐痙惺神经系统来源蛐蛄衐痙.,以上/值均大于山东大学硕士学位论文·.
基因之间的差异比非∪烁螅徊∪薍表明两例病人外周和丛吹膖基因变异时均受到负向选择压力,病毒自身变异起主要作用,同时机体倾向于清除有害的非同义突变。被嵛坏惴治鼋峁允荆珹及非∪死丛碩的氨基酸位点变异不同,同一病人外周和陌被岜湟煳坏慵捌德室膊幌嗤行┌被酸位点变异在屯庵芏加蟹⑸行┪坏惚湟熘环⑸