甲基化原理.ppt

文档介绍：1
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原理:
亚硫酸氢盐处理目标DNA,把没有***化的C统统转化成U
用带P7启动子的PCR引物扩增目标片段
扩增的片段再通过P7启动子转录出RNA
NA用针对U碱基的特异裂解酶进行打断
打断后的片段用质谱进行检测的
G碱基比A碱基重16个质量数
如果原来是***化的C,质谱中会检出G
如果原来是没有***化的C,质谱中会检出A
根据含G峰和含A峰的面积比较,可以推断出原来的样本中有多少是***化的,又有多少是没有***化的
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1 ***化的类型:
2 ***化的功能
3 ***化检测技术
4 ***化检测方法
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***化的类型:编辑
***化包括DNA***化或蛋白质***化
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1)DNA***化。[4]  脊椎动物的DNA***化一般发生在CpG位点(胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤位点,即DNA序列中胞嘧啶后紧连鸟嘌呤的位点)。[1]  经DNA***转移酶催化胞嘧啶转化为5-***胞嘧啶。人类基因中约80%-90%的CpG位点已被***化,但是在某些特定区域,如富含胞嘧啶和鸟嘌呤的CpG岛则未被***化。这与包含所有广泛表达基因在内的56%的哺乳动物基因中的启动子有关。1%-2%的人类基因组是CpG群,并且CpG***化与转录活性成反比。
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2)蛋白质***化。[3]  蛋白质***化一般指精氨酸或赖氨酸在蛋白质序列中的***化。精氨酸可以被***化一次(称为一***精氨酸)或两次(精氨酸***转移酶(PRMTs)将两个***同时转移到精氨酸多肽末端的同一个氮原子上成为非对称性***精氨酸,或者在每个氮端各加一个***成为对称性二***精氨酸)赖氨酸经赖氨酸转移酶的催化可以***化一次、两次或三次。[1] 在组蛋白中,蛋白质***化是被研究最多的一类。在组蛋白转移酶的催化下,S-腺苷甲硫氨酸的***转移到组蛋白。某些组蛋白残基通过***化可以抑制或激活基因表达,从而形成为表观遗传。蛋白质***化是翻译后修饰的一种形式。
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***化的功能编辑
***化是蛋白质和核酸的一种重要的修饰,调节基因的表达和关闭,与癌症、衰老、老年痴呆等许多疾病密切相关,是表观遗传学的重要研究内容之一。最常见的***化修饰有DNA***化和组蛋白***化。