文档介绍：该【标准菌株使用标准操作规程 】是由【飞】上传分享，文档一共【5】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【标准菌株使用标准操作规程 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。集团标准化工作小组#Q8QGGQT-GX8G08Q8-GNQGJ8-MHHGN#
标准菌株使用标准操作规程
标准菌株使用标准操作规程
1检验目的
对实验室的标准菌株进行合理的保存,并规范合理的使用流程,保证菌株的性能稳定可靠。
2范围
微生物实验室保存的标准菌株。
3职责
微生物组工作人员正确执行本操作规程。
4术语和定义
标准菌株
其特征进行了分类和描述,有明确的来源。ATCC(AmericanTypeCultureCollection)美国标准菌株收藏中心。
标准储备菌株
标准菌株经过一代转接后获得的同种菌株。
工作菌株
标准储备菌株传代后得到的同种菌株。
标准培养物
标准菌株、标准储备菌株、工作菌株的统称。
质控菌株
ATCC最佳,但当无法获得时可以使用ATCC演化的菌株或我国国家菌种库储存的标准菌株。特殊情况,例如定性试验可用已知的菌种作为质控菌株。室间质评的菌株即可。
5保存程序
标准菌株
℃低温保存,可以2年以上。安瓿真空包装的,-80℃可长期稳定保存。将标准菌株进行编号和登记。
用1ml无菌的小牛血清或营养肉汤溶解。根据菌种的生长特点,接种到新鲜培养基上选择适宜的培养条件培养18-24h。酵母菌要求3天,形成孢子的微生物宜保存孢子。
标准储备菌株
成分有蛋白胨、牛肉浸出粉、***化钠、甘油、纯化木。相当于20%的甘油。挑取5环菌落加入到1ml甘油肉汤中混匀。苛养菌可以适当增加菌量。-80℃保存。除链球菌和嗜血杆菌以外细菌均可使用。保存期限1-5年。
成分为脱纤维羊血。挑取5环菌落加入到1ml甘油肉汤中混匀。苛养菌可以适当增加菌量。-80℃保存。主要用于保存链球菌、嗜血杆菌及厌氧菌。保存期限1-5年。
工作标准菌株
由标准储备菌株传代得到的菌株。标准储备菌株对多向下传三代。过多的传种会增加变异的机会。标准储备菌株根据菌种特点选择适宜的培养基和培养条件进行培养18-24h即工作标准菌株。储存在2-8℃,可放四周。个别营养要求高的为2周,例如肺炎链球菌和嗜血杆菌。使用时应编号并登记。
编号方法
每个菌的保存管都要有唯一的编号,签字笔标注,便于查找和管理。
来源
数字
意义
购买的标准菌株
1501ATCC25922
15年第1株ATCC25922
储备标准菌株
1501ATCC25922-3
由1501ATCC25922传代而来的3号标准储备菌株
记录管理
菌种应有严格的登记。每个编号都要有详细的记录包括来源、传代、保存方法、使用记录、使用原因、高压灭菌记录等。附表《标准菌株记录表》《标准储备菌株记录表》
菌种保管应有专人负责,保存于专用冰箱中,双人双锁,确保菌种安全。保管人员变动时,必须严格交接手续。
各种菌种应按规定时间接种,注意菌种有无污染及变异,如发现变异时,应及时更换
6使用流程
购买的标准菌株,编号,-80℃保存
用完第二天高压灭菌
标准菌株
性能验证
复苏接种合适的培养基,孵育出菌落
挑取典型的菌落到合适的稳定剂中,编号,-80℃保存,准备n支
标准储备菌株
月质控
周质控
日质控
每月取出一支标准储备菌株传种合适的培养基,适宜条件孵育出菌落
每周取出一支标准储备菌株传种合适的培养基,适宜条件孵育出菌落
传代培养物
每周取出一支标准储备菌株传种合适的培养基,适宜条件孵育出菌落
储备菌株管用完第二天高压灭菌
直接作为工作菌株使用,第二天高压灭菌
传代培养物可以作为第一天的工作菌株使用。4℃保存。以后6天用。
也可以用最后一天的的工作菌株作为传代培养物继续使用一周。
以后的6天每天都用传代培养物传一个新的菌株,作为工作菌株使用。工作菌株使用后第二天高压灭菌
7天后传代培养物作废,进行高压灭菌
重新取一直标准储备菌株传种,进入下一轮周期,程序如上面几个步骤
购买的标准菌株(可追溯来源,卫生部室间质评菌株可作为质控菌株使用,按照标准菌株管理)
0代
接种传代培养一次,并进行纯度和生化鉴定
1代
作为“储存标准菌株”进行多个分装保存,按照特定条件储存和推荐的储存时间
每天传代平板作为第二天的工作标准菌株,进行室内质控,用完立刻高压处理
2代
进行纯度检查和生化鉴定。作为传代物或者第一支“工作菌株”特定的储存条件和推荐储存时间
可以再重复一周,规则同上。但一般来说工作菌株不能超过3代
室内质控
7质量控制
观察菌落的典型形态是否符合菌种。有没有杂菌生长。
用氧化酶、触酶、上机等生化试验,鉴定菌种有没有变化。
如果有污染或怀疑有问题时,应准备新的首次传代物或者获取新的标准菌株。
8参考文献
序号
唯一性编号
文献名称
ISBN978-7-/R·19863
《全国临床检验操作规程》第四版
ISBN978-7-5478-1226-6/R·395
《临床微生物学诊断与图解》第三版
GBT27405-2008
实验室质量控制规范食品微生物检测
SNT2632-2010
微生物菌种常规保藏技术规程
WST232-2002
商业微生物培养基质量检测规程