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双歧杆菌黏附蛋白的筛选、克隆表达及其功能的初步研究.pdf

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双歧杆菌黏附蛋白的筛选、克隆表达及其功能的初步研究.pdf

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文档介绍:蝴飙静㈣⋯期圳㈨月叫屿签字日期:沙月邝日学位论文独创性声明学位论文版权使用授权书他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得直昌盔堂或其他教育机构本学位论文作者完全了解直昌太堂有关保留、使用学位论文的规定,有权阅。本人授权直昌太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名中:保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊馀贪电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表,并通过网络向社会公众提供信息服务。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ导师签名中:
了上述晁绺司膊因的存在,K苹蛴缮因的同源率分别达到摘要克隆抗体,通过斑点杂交法筛选,证实了婴儿双歧、船,婴儿双歧、鹏,青春双歧、船,乳双歧、肌存在蟮鞍住R萨、鳵R铮橹双歧杆菌在调节肠道微生态平衡、抑制病原微生物的侵入、抗肿瘤、抗突变和抗衰老等方面具有重要的作用。双歧杆菌对肠黏膜上皮细胞的黏附和定植是其发挥生理作用的前提,也是评价其作为微生态活茵制剂的一个重要指标。本文主要探究了黏附蛋白在双歧杆菌属中的分布,探求了长双歧杆菌未知功能的黏附蛋白的存在。即:⑼ü肿涌寺”泶锛际趸竦昧顺に绺司じ降鞍⒋铀闹晁绺司谢竦昧死郆蛋白的基因和蛋白;⒁源判阅擅撞牧衔载体,直接筛选获得了黏附肠上皮细胞的长双歧杆菌的表面蛋白;⒍陨鲜龅鞍滋外黏附肠上皮细胞的生物学功能进行了初步研究。有关论文的详细内容分述如下。益生菌和致病菌的黏附是影响宿主健康的重要步骤。本文综述了近年来益生菌及致病菌对肠道上皮细胞黏附机制的研究进展,比较了其黏附后的生物学效应差异,重点对两者之间的竞争性黏附作用进行了概述。在上述基础上对益生菌抑制致病菌双歧杆菌的黏附蛋白谝嫔械姆植技肮δ懿钜煜视斜ǖ溃4吮疚目展了较为详细的研究。首先,#;蟪Ω司鶧笥盏急泶铮珿亲和柱纯化,获得了高纯度的鞍住A孔拥惚昙荁蛋白证实了其与肠上皮细胞跚的黏附。平板计数法验证了缘ズ嗽錾钏固鼐痛蟪Ω司篐じ紿具有明显的抑制作用,而对长双歧杆菌和植物乳杆菌的黏附没有显著影响。¨%,而对產为从益生菌中获得蚶郆的基因和蛋白,本文制备了抗鞍椎氖笤炊.%、.%、.%和.%。类似地,克隆表达的这四种鞍字杏腥嗨频鞍妆恢な刀猿ι掀は赴叙じ焦δ堋探求未知功能的双歧杆菌黏附蛋白是一项具有挑战性的研究。为此,本文采用的研究前景和发展趋势进行了展望。无显著影响。Ⅱ。
了磁珠偶联肠上皮细胞碎片,与长双歧杆菌膜蛋白相互作用的策略,分离了逐附相关蛋白。经质谱测序、生物信息学分析,获得了完整的蛋白序列和基因序列。同样,经克隆表达、量子点标记,发现这四种蛋白中的三种对赴叙じ焦能。其中訦细胞因子儿一、的产生有显著影响。综上所述,探究益生菌的黏附蛋白和相关基因,在细胞水平上研究益生菌对致病菌的黏附拮抗以及对肠上皮细胞产细胞因子的影响,对提高我,为功能基因和功能蛋白在微生态学领域的应用奠定一定的理论基础。采用磁珠法获得益生菌的黏附蛋白,通过量子点标记验证其黏附功能,是益生菌功能研究方面的一种创新。本研究将为今后开展益生菌的功能基因和蛋白的研究,提供一种方法学和新的思路。关键词:双歧杆菌;鞍祝豢寺”泶铮涣孔拥悖籋细胞;细胞因子;黏附抑制摘要
猼内卯胞砌’缸纪,.蛔餌顉笏琣£西,.砌加钞,瘴鼢鱝鰕,觚莍鼬緎矗瓵曲緒嬲Ⅳ猘鷇缸锄緈且的锄出,最吮彻船,最口面,腜玎廊、船锄如萕点和办加∞疗,齝朋禗叫彤刀缈括舶:舶.%,,晰阛猘咳口停觯琣锄力面赾纪,话錼谢蓿琭及肠馏甜所锄籧憾郑鳩鳵瓸萨骹螅珼愕模骦而赾招,.砌柚鴑,锄,鷗廿一瓵鷇鷒印锄,锄誶鷇∞疗:.輙¨∥鵦%.%、.%、.%旬仔旬穑畂襷琹鹚鵺瓸蝏觢如甊缸琧嬲胹血賒閚髉蟆⑼皌如..,、们凳陀骾,騬瑆瓵.,£妇纪,皁猟,餌,Ⅳ
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