文档介绍：导师签名中炊九涛牢学位论文作者签名中:童孵学位论文作者签名中:童《豸学位论文独创性声明学位论文版权使用授权书签字日期:劭年石月日签字日期:闦月剀,甓嘣拢缛他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得直昌太堂或其他教育机构本学位论文作者完全了解南昌太堂有关保留、使用学位论文的规定,有权阅。本人授权直昌太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。签字日期:保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊馀贪电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表,并通过网络向社会公众提供信息服务。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ
摘要大肠杆菌::且鸪鲅P猿ρ缀腿苎P尿路综合症的主要致病菌。牛肉、奶制品、蔬菜等食物是其主要传播途径,除此之外,动物和人、人和人的接触也可能导致大肠杆菌:感染。由于其感染发病快、死亡率高,严重影响了人民的身体健康。因此,快速诊断大肠杆菌:具有重要的现实意义。本文旨在建立快速、特异性强、适用于大量样品和现场检测的大肠杆菌:胶体金免疫层析方法。本文采用全菌抗原和细胞碎片抗原分别免疫日本大耳兔,制备了抗大肠杆菌:多克隆抗体。获得的多克隆抗体效价达7直鹩眯了幔蛩犸Хê痛珠吸附法对多克隆抗体进行纯化,纯化后的抗体通过甈械鞍追治觯并用斑点杂交对纯化后的抗体进行特异性分析。结果显示,,而磁珠吸附法能有效去除这些杂蛋白,得到较纯的抗体。纯化后的多克隆抗体均与其它一些细菌有交叉反应。本文采用胶体金标记商品化的单克隆抗体,通过把多克隆抗体和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线线椭士叵,研制了大肠杆菌:胶体金快速检测试纸条,并对其进行了评价。通过实验,确定了试纸条工艺条件如下:标记为、蛋白标记量为/、金标抗体离心转速为痬、,结果显示试纸条的灵敏度为鱿赴痬灾教醭虢鸹粕咸亚蚓和鼠伤寒沙门氏菌有弱阳性反应外,与其它株常见的细菌无交叉反应。℃加速保存实验结果表明,本试纸条常温保质期在个月以上。在H饣蜉难分刑砑哪康木增菌螅灾教跫觳馕Q粜越峁为了进一步提高试纸条的特异性和灵敏度,本文采用提取的大肠杆菌:鞭毛蛋白免疫/∈螅赴诤稀⑸秆⒖寺』驳玫株能稳定分泌抗大肠杆菌:单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并制备了相应的腹水。配对结果显示,有钥固蹇捎糜谑灾教醯闹票浮关键词:大肠杆菌:;多克隆抗体;胶体金;免疫层析;单克隆抗/、
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