文档介绍:上海交通大学
硕士学位论文
含硒类球红细菌的优化培养及生理功能的研究
姓名:王劲松
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:俞吉安
含硒类球红细菌的优化培养及生理功能的研究
摘要
本实验以光合细菌中的类球红细菌 1 号菌株(Rhodobacter Sphaeroides )为研究对
象分析了碳源氮源和生长因子等因素对 1 号株生长的影响实验表明 1 号株能利用
多种碳源以乙酸钠为例浓度在 3g/L 以下时菌株生长随浓度增加而加快浓度达到 5g/L
时菌体生长滞留期延长菌株对有机氮源蛋白栋和无机氮源 NH4Cl 均能利用另
外乙酸钠为碳源时一定浓度的酵母膏对菌株生生长是必需的综合对 1 号株生长影响
较大的四个因素进行了正交实验其最适培养基为乙酸钠为 4g/L NH4CL 为 蛋
白胨为 及酵母膏为
为了确定类球红细菌转硒培养的最佳条件研究了无机硒的加入浓度时间对菌体
生长和转硒效率的影响实验表明无机硒的浓度低于 1 10-5mol/L 时对类球红细菌的
生长基本没有影响并能将 %的无机硒转化为有机硒转硒的最佳时间是在接种后
12 小时左右此时转硒效率最高实验还表明分批补料培养可以提高菌体浓度在亚
硒酸钠浓度为时可使转硒效率由提高到, 使绝对量增加
比较了含硒菌体与一般菌体灌喂小鼠对其全血谷胱甘肽过氧化物酶 GSH- Px 活
性和血清丙二醛 MDA 含量的影响体内试验表明用 5ml/kgbw 和 10ml/kgbw 剂量
的含硒类球红细菌灌养小鼠可以使其全血 GSH-Px 酶活性提高 %和 %, 使其血
清丙二醛 MDA 含量降低 %和 % 实验结果表明了含硒菌体提高体内抗脂
质过氧化能力的作用较一般菌体更为显著
免疫学实验分析表明含硒光合细菌能有效增强小鼠腹腔吞噬细胞的功能正常组
小鼠用类球红细菌不含硒灌胃后吞噬百分率提高不多免疫抑制组的小鼠用类球红细
菌不含硒灌胃后吞噬百分率提高约61% 吞噬指数提高约59% 另外含硒类球红细
菌能一定程度活化淋巴细胞类球红细菌灌胃组不含硒与饮水组相比刺激指数提高了
21% 含硒组提高了35% P< 在免疫抑制处理后不含硒组刺激指数提高了23% 而
含硒组提高了51% P< 实验显示了含硒类球红细菌有较强的免疫调节活性
关键词硒类球红细菌抗脂质过氧化免疫调节
IV
The Optimum Cultivation and Physiological Functions of
Selenium-containing Rhodobacter sphaeroides
Abstract
Using Rhodobacter sphaeroides as experimental strain , we analyzed the effect of a
variety factors including carbon sources, nitrogen sources and growth factor on the growth of .
The can make use of a series anic carton sources. When the concentration of NaAC is
less 3g/L, the growth rate of has a positive relativity with the level of NaAC. After the
concentration reach 8g/L, the lag phase paratively longer. The strain can grown on both
polypeptone or NH4Cl-containing media. And a certain concentration of yeast extract is necessary
when NaAC is used as carbon source. With the orthogonal designed experiment of four factors , we
determine an optimum medium which is most suitable for growth: NaAC concentration at 4g/L,
NH4Cl at