文档介绍：维普资讯
一一一子
第考第朔病毒学报Ⅷ
年月旺
栗疫菌低毒力与真菌病毒
的序列同源性
巾国科学院微生物所,北京,/ ’.//’多/
/ ;
摘要以我国巢疫苗棚低毒力菌株广西的
一束端标记作探针, 与种真菌病毒进行分子杂交探针可与紫孢
侧耳病毒和小麦全蚀菌病毒· 的
杂交, 但不能与黑曲霉病毒.、产黄青霉病毒
和稻瘟菌病毒【帅∞的杂交。当以低毒力菌替

关键词同源序列,与低毒力相结台的. :,祭真菌病毒,塑栗疫苗刚鳓嗍二
栗疫菌低毒力菌株在意大利的发现及用于生物防
治, 拯救了因栗疫病危害而濒临绝灭的欧洲栗树林”此后在北美密西根。、西维吉尼
亚、康涅狄克和新泽西等州也发现了低毒力菌株研究了来自等低毒力菌株中
与低毒力相关的的遗传结构及表达策略。。,获得了转基因低毒力工程株, 为北
美大板栗树林的恢复带来了希望。国内于云南、广西找到低毒力菌株, 成功地实现了低毒力
基固转移,使强毒力菌株基因转变为低毒力菌株,并证明中国低毒力菌株
的与欧洲株同源,而与北美洲株非同源“。
由于栗疫菌低毒力基因具有重要的生物学意义及经济价值, 迄今为止是真菌病
毒和真菌中, 在分子生物学方面研究得最深入的菌, 它与马铃薯病毒组
亲缘相近。, 其存在于菌体细胞内, 缺少典型病毒蛋白质衣壳, 密集
于多型性有界膜的颗粒内”。低毒力菌株—的低毒力表型的遗传信息, 即贮
存于胞质内复制的这种中研究与低毒力相关的与其它真菌病毒的
关系,将对真菌病毒的基础研究, 以及如何调控病原真菌对寄主的毒力提
供依据
材料和方法
菌种来源和菌体培养栗疫菌低毒力菌株和云南由本实验室保存, 菌落特征,
致病力及与欧洲、美洲株的比较见前文
小麦全蚀菌泰安株∞册船;, 产黄青霉//. 黑曲霉
等均为本实验室保存稻瘟菌帅由中国农科院褚菊征教授惠赠。紫孢
年月日收稿, 月日修回
维普资讯
期梁平彦等:栗疫苗低毒力与真菌病毒的序列同源性
侧耳/ 来自京郊菇房。
栗疫苗菌体培养见文献小麦全蚀苗培养见文献“。稻瘟菌培养基为酵母膏% 一% 可溶性
淀粉% 一% 。
真菌病毒蛐夏菌体的提取小麦全蚀菌病毒、产黄青霉病毒黑曲霉病毒
. 和紫孢侧耳病毒的提取分别见文献“: 栗疫菌苗体的提取根据文献并作修
改冷冻菌丝体内加皿., 缓冲液,% 及巯
基醇,少许金刚砂研蘑,然后加苯酚:氧仿:异成醇::,冰浴中振荡。
离心去沉淀, 上清液调至含% 乙醇和% —一纤维素粉, 冰浴过夜, 离心
分钟,弃上清, 沉淀悬浮在含% 乙醇的内,洗次, 以不含乙醇悬浮纤维素粉, 在冰洛
中轻摇分钟, 离心分钟,重复次, 合并两次上清,加乙酸钠达.,加倍% 冷乙
醇, 一℃过瘦, 离心分钟, 悬浮沉淀
聚丙烯酰胺凝胶电泳/凝胶, 电压/电泳小时,硝酸银染色, 分子量参照物为黑曲
霉病毒九分子量分别为., .、. . .×
探针的标记及分子杂交的纯化及一”末端标记技术见文献”。斑点杂交参照⋯
的方法, 将硝酸纤维素滤膜用无离子水和× 缓冲液分别处理分钟, 烘干取适量乙醇沉淀的
加无离子甲酰胺, ∞℃煮沸分钟,冰灌骤冷,真空抽干后悬浮于重