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Ⅰ重氮反应法测定总胆红素和结合胆红素
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【实验原理】 血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应,产生偶氮胆红素;非结合胆红素须有加速剂咖啡因-苯甲酸钠-醋酸钠作用,其分子内氢键破坏后才能与重氮试剂反应,也产生偶氮胆红素。,最后加入碱性酒石酸钠使紫色偶氮胆红素(吸收峰530nm)转变成蓝色偶氮胆红素,在600nm波长比色,使检测灵敏度提高。
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【试剂】
-苯甲酸钠试剂
。
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取5支试管,分别编号,然后按表稀释胆红素储存液配制胆红素标准液。
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【参考范围】
血清总胆红素:~19μmol/L(~);
血清结合胆红素:~(~)。
【临床意义】
(1)有无黄疸及黄疸程度的鉴别。
(2)肝细胞损害程度和预后的判断胆红素浓度明显升高反映有严重的肝细胞损害。但某些疾病如胆汁淤积型肝炎时,尽管肝细胞受累较轻,血清胆红素却可升高。
(3)新生儿溶血症血清胆红素有助于了解疾病严重程度。
(4)再生障碍性贫血及数种继发性贫血(主要见于癌或慢性肾炎引起),血清总胆红素减少。
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谁是动名词?
doing
Ⅱ胆红素氧化酶法测定总胆红素和结合胆红素
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【试剂】
-HCl缓冲液()称取三羟甲基氨基甲烷(Tris),,十二烷基硫酸钠(SDS),溶于去离子水90ml中,在室温(25~30℃)用1mol/(约用6ml),再加蒸馏水至100ml,置冰箱保存,此液含4mmol/L胆酸钠、15mmol/LSDS。
()。
,按说明书要求复溶,但复溶后冰箱保存不宜过长(约可保存1周),如系液体(可能含有甘油),置4℃冰箱可保存较长时间,BOD贮存溶液的酶活性一般在数千至1万~2万U/L,~。
(342μmol/L)按胆红素测定J-G法中方法配制,或市售合乎要求的标准液。
,或用冻干品按说明书要求重建。配制后分装于聚丙烯管内,-70℃保存,可稳定6个月。冻干品未重建前置低温中,至少稳定1年。
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加入BOD工作液后立即混匀,置37C水浴5min,用分光光度计,在450nm波长,去离子水调零,读取各管吸光度(A)。用于对照管的比色杯与非对照管的比色杯不得混用。
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【检验原理】
,在钒酸盐和表面活性剂存在下,可以被氧化成胆绿素。与此同时,胆红素特有的黄色也随之消失。测定胆红素氧化前后吸光度的差,可以计算出样品中总胆红素的浓度。
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