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细菌的生化反应实验
掌握细菌鉴定中常用生化实验的原理和方法
了解细菌生化试验在细菌鉴定及诊断中的重要意义
一、实验目的
二、实验原理
不同的细菌具有不同的酶系统,对糖类和蛋白质的分解能力不同,最终形成的分解代谢产物不同。
通过对代谢产物的检测,可鉴定细菌。
***红实验()
微生物进行混合酸发酵,产生各种有机酸——pH下降——加入指示剂***红——红色

菌种:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、未知菌斜面
培养基:葡萄糖发酵培养基试管、乳糖发酵培养基试管、
蛋白胨水培养基、葡萄糖蛋白胨水培养基、
明胶发酵培养基等。
试剂:大肠杆菌IMViC鉴定管、金黄色葡萄球菌生化鉴定管、
***红指示剂、40%KOH、5%α-萘酚、***、吲哚试剂等
其他材料:试管架、酒精灯、接种环等
三、实验材料
(一)糖发酵试验

取葡萄糖发酵培养基管3支,分别接种大肠杆菌、未知菌,第三支不接种,作为对照。另取3支乳糖发酵培养基,作同样的操作。
℃,24-48h。
。
三、实验步骤
OF:Oxidizeandferment
氧化发酵实验

(1)吲哚试验:于培养24h后的蛋白胨水培养基内加3-4滴***,摇动数次,静置1-3分,待***上升后沿试管壁徐徐加入2滴吲哚试剂,在***和培养物之间产生红色环状物为阳性反应。
(4)柠檬酸盐试验:培养48h后观察柠檬酸盐斜面培养基上有无细菌生长和是否变色,蓝色为阳性,绿色为阴性。
菌名
IMViC试验
吲哚试验
***红试验
伏-普试验
柠檬酸试验
大肠杆菌
未知菌
对照