文档介绍：第卷第期华中农业大学学报. .
年月. 。~
猪母细胞发生早期的细胞凋亡变化
霍道坦陶勇王勇权青田宁宁成志军章孝荣
.安徽农业大学动物科技学院,合肥;.
摘要为研究猪卵母细胞发生早期卵巢上细胞的凋亡情况,制作妊娠、、、;母猪胎巢的
石蜡切片,并进行荧光染色。结果发现,母猪妊娠到时,胎猪卵巢上即可见原始生殖细胞和卵原细胞的凋
亡,随着妊娠时间的延长,凋亡也逐渐增加,妊娠、、、和母猪胎儿卵巢上卵原细胞的凋亡率分别为
. 、. 、. 、. 和. ,同时,颗粒细胞的凋亡率则分别为. 、. 、. 、
. 和. 。结果说明,在猪胎母细胞发生早期,即开始发生了卵原细胞和颗粒细胞的凋亡,且有逐
渐增加的趋势。
关键词胎儿;猪;卵巢;卵原细胞;凋亡
中图法分类号. 文献标识码文章编号——
卯母细胞的发生是胚胎发育过程中的重要生理聚甲醛℃固定过夜,梯度乙醇中脱水,用二甲苯作
事件。卵母细胞发生时,即使是在生理条件下,也不透明处理,再浸蜡包埋。用组织切片机切成~
是所有卵原细胞都发育到减数分裂阶段,绝大部分/厚的石蜡切片连续切片,分别进行组织学和
经凋亡后闭锁退化。就是那些启动减数分裂的卵母荧光染色,℃恒温箱放置,℃保存。
细胞,也有相当数量在发育着的卯泡中凋亡闭. 卵巢切片的组织学染色
锁。经典理论认为,大多数哺乳动物的卯原细将石蜡切片脱蜡复水后,苏木精伊红染色,显微
胞经大量增殖后,在胎儿出生前后便停止增殖,即不镜下观察拍照。
再能产生新的卯原细胞,而是数量一直减少。母猪. 卵巢切片荧光染色
妊娠后至个月是雌性胎母细胞发生的关键将石蜡切片脱蜡复水后,用洗遍,每次
时期,为阐明在卵母细胞发生中细胞凋亡情况及变,吸尽液体;加入染色液,染色
化特点,笔者以猪胎儿为研究对象,测定猪卵巢发生;去染色液,用洗遍,每次,吸尽
过程中卵原细胞的凋亡情况,以期为认识和利用卵液体;滴滴抗淬灭封片液,盖上一洁净的盖玻片,
母细胞发生、发育和退化规律奠定基础。尽快上荧光显微镜观察拍照。根据此前文献报道的
方法。,分别统计个视野下的凋亡的细胞数,计
材料与方法
算细胞凋亡率。
. 材料
结果与分析
生长发育良好的二元杂交母猪,配种当天计为
妊娠。对分别妊娠至、、、、的母猪根据凋亡细胞的特点,通过荧光染色可观察到
用前列烯醇进行流产,采集胎猪,标记并放人有冰袋凋亡的细胞。在荧光显微镜下,可观察到凋亡细胞
的保温箱内立即带回实验室。的细胞核形态呈现浓染、碎裂、固缩图版。胎龄
. 猪胎儿卵巢切片的制备为的胎猪卵巢组织切片图版—在荧光染
将带回实验室的胚胎用清洗后,打开腹腔色后发现少量的细胞核浓染图版—;胎龄为
剥离卵巢。胎龄时外观不能分辨性别时,剥离性的胎猪卵巢组织切片图版工一,在荧光染色
腺,用组织学方法染色判断。将所得卵巢用多后,除了观察到卵原细胞的凋亡外,还可见凋亡的膜
收稿日期:——;修回日期:——
国家自然科学基金项目资助
通讯作者.:.
霍道坦,男,年生,:胚胎工程.—:一.
华中农业大学学报第卷
细胞图版—;胎龄为的胎猪卵巢组织切卵原细胞、颗粒细胞和膜细胞图版—;胎龄为
片图版工一,在荧光染色后发现,细胞核