文档介绍:兰游旋埤麦弓磊鬈一兰涛捉一铋右~年埤埤~学位论文作者签名:~年加加~本同意如本;学校有权保存学位论文的印刷本和电子版,并采用影印、缩印、扫描、数字化或其它手段保存论文;学校有权提供目录检索以及提供本学位论文全文或者部分的阅览服务;学校有权按有关规定向国家有关部门或者机构送交论文的复印件和电子版;在不以赢利为目的的前提下,学校可以适当复制论文的部分或全部内容用于学术活动。年经指导教师同意,本学位论文属于保密,在年解密后适用本授权书。指导教师签名:解密时间:年月日各密级的最长保密年限及书写格式规定如下:~一年年~,年年~内秘机一,~一谟凇~于少少~一少可可~一弘部密密一一可∞一★★一、,、,,.
’:。..甽ⅰぁ珆甞.
//疘//本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师指导下,进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本学位论文的研究成果不包含任何他人创作的、已公开发表或者没有公开发表的作品的内容。对本论文所涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本学位论文原创性声明的法律责任由本人承担。年
摘要植物在漫长的进化过程中产生了性别的分化,在部分高等植物中产生了由性染色体参与的性别决定系统。植物性染色体的相关研究对研究植物性别决定的遗传机制和植物性别的多态性具有重要的意义。对高等植物性染色体及性别决定的研究目前主要集中在型的白麦瓶草、木瓜以及疉型的酸模等几种模式植物上,这些研究为了解植物性染色体的起源和进化及性别决定方式提供了许多重要线索,但由于研究的植物种类有限,研究工作进展缓慢。目前发现,具有性染色体的植物大多是型或疉型性别决定方式,因而对植物型性别决定方式的研究甚少。银杏为型雌雄异株裸子植物,菠菜为型雌雄异株被子植物,对它们进行研究可以填补植物型性别决定方式及蚖染色体进化研究工作的空白和为蚘染色体进化的研究提供新的证据;此外,通过对两种实验材料的综合研究,可以比较两种性别决定方式的特点,以及蚙染色体、蚖染色体的异同,对全面研究植物性染色体的起源及其在进化过程中发生的进化事件和相应的分子机制具有重要的意义。本研究应用常规核型分析技术、荧光原位杂交技术和染色体显微分离技术首次对菠菜和银杏性染色体的形态差异性和重复序列组构差异性进行了分析;在分子水平上,首次应用分子标记技术对菠菜雌、雄基因组钜煨进行了研究,并筛选了菠菜性别相关的分子标记;从表观遗传学的角度首次应用***化分析技术对菠菜和银杏雌、雄基因组募谆讲钜煨和***化模式进行了研究,对菠菜和银杏性染色体的***化水平和***化模式进行了分析,并筛选了性别相关的***化差异序列。具体研究结果如下:诵头治鱿允静げ舜浦甑暮诵湍J轿,雄株的核型模式为觯げ说腦和旧逯湟裁挥忻飨缘男翁钜臁本研究应用荧光原位杂交技术将在菠菜雌、雄细胞中进行了物理定位,首次发现了菠菜蚘染色体在形态上的差异。在雌性中期分裂相中检测到鲈咏恍藕哦谛坌灾衅诜至严嘀兄患觳獾个信号,其中旧宥瘫区域具有杂交信号,而旧宥瘫勰┒嗣挥屑觳獾皆咏恍藕拧Mü齈
扩增获得了雌、雄株菠菜的蛄校渫葱愿叽ヒ陨希げ薠和色体上位点的差异可能是由于性染色体在进化过程中,旧宥J了该位点所致。ü齈扩增获得菠菜序列,并利用多色荧光原位杂交技术首次将和端粒序列同时定位到菠菜雌、雄细胞中期染色体上,初步尝试建立了菠菜的分子核型。其中旧逋本哂腥中藕牛位于短臂末端区域,位于长臂近着丝粒区域,端粒序列位于着丝粒区域和染色体端部,而旧逑啾萖染色体缺失了的位点,根据这三种不同颜色信号在染色体上的相对位置和数目可以将性染色体与其它染色体区分开来。诵头治鱿允疽哟浦甑暮诵湍J轿,雄株的核型模式为拥男匀旧迨堑谝欢灾凶潘苛H旧澹琙染色体和旧宓牡谋鄢ず捅郾让挥忻飨缘那穑嫣宕笮∮斜冉厦飨缘牟钜欤其中旧宓乃嫣褰闲。琖染色体的随体较大。应用荧光原位杂交技术将在银杏雌、雄细胞中进行物理定位,在雌、雄细胞中均检测到了鲂藕牛其中旧迳系脑咏恍藕琶飨源笥赯染色体,本研究首次在分子细胞遗传学水平上证实了银杏的性别决定机制为。通过┰龃啤⑿壑暌拥腎序列,在雌株中获得了两条蛄校渲幸惶跷4菩蕴匾斓腎序列,这也是植物中首次发现的与性别相关的蛄校銲蛄杏胄壑曛械腎列一致,而序列则发生了约的缺失。蚙染色体上位点拷贝数的差异是旧逶诮讨衦目奖词黾铀拢趓位点扩增的时候部分序列发生丢失,因此产生了雌性特异蛄小萌旧逑晕⑶懈罴际醴掷胍拥腤染色体,并以旧逄匾煨列为杂交探针对银杏的雌、雄细胞中期染色体进行了染色体绘染,结果显示染色体和旧逶谄涑け劬嗄┒/囊欢吻蛟咏恍藕诺那慷扔忻飨圆钜欤表明该区域序列组成存在差异,是银杏性染色体上的非配对区域。这是首次利用染色体绘染技术发现的植物性染色体上的非配对区域。序列的差异会导致性染色体的配对抑制,该区域是