文档介绍：丙戊酸钠HPLC检测方法
安捷伦1260
丙戊酸钠母液配制:精密量取丙戊酸钠10 mg,加5 ml 甲醇溶解制得2mg/ml的丙戊酸钠储备溶液。
内标溶液:精密称取环己烷羧酸10mg至10ml溶量瓶中,。(10mg 环己烷羧酸+ 10ml ,,。)
衍生化试剂:50mg 2溴苯乙酮+5ml乙腈溶解,得10mg/ml衍生化试剂。
血浆样品处理:取血浆1 ml,置具塞试管中,加1mg/ml入内标环己烷羧酸100μl,3mol/,混匀后,再加入正己烷6ml,涡旋混合5min,离心
5min(4000r/min)。精密吸取上层有机相5ml,加2-溴苯乙酮100μl,三乙胺100μl ,置55-60℃水浴中衍生化反应15min,氮气吹干有机相。用1ml甲醇溶解残余物,取20μl进样。
岛津:
丙戊酸钠标准溶液:,置于50 mL容量瓶中, mol·L-1氨水稀释至刻度,摇匀,作为丙戊酸钠标准溶液( mg·mL-1)。
内标溶液: mg,置于50 mL容量瓶中, mol·L-1氨
-1水溶解并稀释至刻度,再精密量取该溶液5 mL,置于25 mL容量瓶中, mol·
氨水稀释至刻度,摇匀,作为内标溶液( mg·mL-1)。
衍生化试液:准确称取2- mg,置于25mL容量瓶中,用乙腈溶解并稀释至刻度,摇匀,作为衍生化试液(含2- mg·mL-1),放置于冰箱中保存。
血样的制备:取血浆200 μL,置空白采血管中,加入内标溶液30 μL 和丙戊酸钠标准溶液20 μL,再加入1 mol·L-1硫酸溶液200 μL,振摇混匀,然后加入正己烷4 mL振摇萃取3 min,静置5 min使之充分分层,分离出上清液2 mL于另一试管中,加入衍生化试液40 μL 和三乙胺20 μL,涡旋混匀,于61~65 ℃水浴衍生化适当时间,然后在空气/氮气流下蒸发至干,立即取出, mL涡旋溶解,作为血清样品溶液。
Water
500mg· L-1丙戊酸储备液:精密称取丙戊酸对照品25mg 加水溶解并定容至50mL即得;
内标液:精密称取环己烷羧酸12. 8mg ,加0. 5mol· L- 1氨水溶解并定容至100m L; 衍生化试剂:精密称取α-溴苯乙酮100mg,用乙腈溶解并定容至10mL。供试品配制后置4℃冰箱保存。
血清样品处理:取0. 25mL血清样品,分别加入内标溶液和1mol· L-1硫酸各0. 25mL混匀,用4mL 正戊烷涡旋振荡萃取5min 后离心( 4000r
·min- 1 ) 5min,吸取上清液并加入三乙胺和衍生化试剂各20μL,置50~ 55℃水浴衍生化反应10min后氮气流吹干,用100μL甲醇溶解后取15μL进样分析。
安捷伦1260
丙戊酸钠储备液: mg至50 mL 容量瓶中,加甲醇至刻度, mg /mL 的丙戊酸钠储备溶液。利用制备的丙戊酸