东师实验4谷丙转氨酶活性的鉴定及活力单位的测定.doc

文档介绍：东师实验4谷丙转氨酶活性的鉴定及活力单位的测定
综合研究性实验四:
谷丙转氨酶活性的鉴定及活力单位的测定

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[一]实验材料
动物肝脏
[二]实验试剂
%NaCl溶液

%谷氨酸溶液(1%KOH溶液中和)
4.%丙酮酸钠溶液(用1%KOH溶液中和)
%KHCO3溶液
%一溴乙酸溶液(用1%KOH中和)
%乙酸溶液

将2份酚和2份水(按重量计算)混合后,放入分液漏斗中,振荡。
静止24h以后分层,将下部酚层放入瓶中备用。新配制的酚展层剂可以反复使用1周。
计算公式
计算结果
参考数值
(七)注意事项
,采用二步法,可防止胆红素的干扰;
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U/L(30℃),或1000 U/L(37℃),当样本中ALT活力超过600 U/L(30℃)或1000 U/L(37℃)时,可用生理盐水稀释,,测定,结果×3;
,或以蒸馏水为空白,工作液在340nm处吸光度<,请勿使用;
(试剂在2-8℃,避光保存,有效期为1年;如用一步法,工作液在2-8℃避光保存,可稳定3周)。

[一]基本原理
测定SGPT活性可反映出肝细胞的坏死程度,因此是检测肝功能损坏的灵敏指标之一。很多有毒物质易引起肝损伤,造成肝实质细胞的变性及坏死,例如,l4)等化学药物可以诱发动物发生急性中毒性肝炎和肝坏死