文档介绍：湖南农业大学
博士学位论文
恩施高富硒植物碎米荠含硒多糖研究
姓名:杨大伟
申请学位级别:博士
专业:植物学
指导教师:吴永尧
20071201
摘要湖北恳施州高山地区生长着一种高富硒植物——碎米荠8植物不仅硒含量高,而且是一种药食两用植物。为了开发利用碎米荠植物资源,本文以湖北恩施碎米荠干制粉末为原料,选择含硒多糖为研究切入点,对碎米荠论和实践依据。主要研究结果如下。槊总嗵嵌坎舛ǚ椒ǖ钠兰根据检测方法的重现性、精密度、回收率和稳定性等指标来评价检测方法的可行性,定量测定碎米荠多糖可以采用苯酚一硫酸比色法。同时发现,组成碎米荠多糖的单糖残基以吡喃糖为主。槊总舛嗵堑慕崽匦为探讨碎米荠粗多糖的浸提特性,以水为浸提剂,首先研究浸提温度、浸提时间、浸取剂用量、提取次数和浸提液值等单因素对碎米荠租多糖提取量的影响规律,然后设计四元二次通用旋转组合试验方案研究多因素对碎米荠粗多糖提取量的综合影响。结果表明,浸提温度、浸提时间、浸取剂用量、提取次数和浸提液值等单因素对碎米荠粗多糖、提取次数魏徒嵋簆滴是碎米荠粗多糖适宜的提取条件,粗多糖提取量达到掖汲恋硭槊总侄嗵堑墓媛为探讨乙醇沉淀碎米荠粗多糖的特点,首先考察乙醇浓度对多糖沉淀量的影响,然后研究乙醇沉淀次数对多糖沉淀量的影响。结果表明,%Ⅳ囊醇浓度是碎米荠粗多糖的最佳沉淀浓度;用%的乙醇对沉淀的碎米荠粗多糖经蒸馏水溶解后再沉淀一次,不但可以最大程度地将碎米荠粗多糖提取液中的多糖沉淀出来,而且沉淀的碎米荠粗多糖得到了一定程度的纯化,有利于后续粗多乙醇在沉淀碎米荠粗多糖提取液中的多糖时,有一种未知化合物与多糖一起被沉淀,为了将多糖共沉淀物与多糖分离,首先用磷酸氢二钠絮凝粗多糖提取液。离心后,收集沉淀,上清液加入磷酸氢二钠絮凝共沉淀物,反复上述操作到上清含硒多糖的分离纯化特性进行了系统探讨,为碎米荠植物资源的开发利用提供理槊总煞畚J匝椴牧希≡裾袅提取量有显著影响;浸提温度℃、浸提时间⒔〖劣昧糖分离纯化过程的进行。槊总嗵枪渤恋砦锏姆掷氪炕椒液加入磷酸氢二钠无絮凝现象,合并沉淀,将沉淀用适量的蒸馏水溶解。向溶液中加入***,***沉淀的多糖与共沉淀物再用蒸馏水溶解,溶液用磷酸氢二钠絮ァ
的研究及其上述两个因素对共沉淀物絮凝量综合影响的研究,发现影响共沉淀物槊总舛嗵堑纳毓泊嫣匦色素与碎米荠粗多糖共存时,为了研究碎米荠色素在粗多糖溶液中被脱除的基本特性,以活性炭为吸附剂,在脱色温度、脱色时间与活性炭用量等单因素试验的基础上,进行了三因素三水平的正交试验。试验结果经方差分析发现,上述单因素对碎米荠色素的脱除有显著影响,并得到脱除碎米荠粗多糖色素的适宜条件为脱色温度℃。脱色时间尽量减少粗多糖被活性炭吸附造成的损失,以蒸馏水为解吸剂,选择解吸温度、解吸时间及解吸剂用量为试验因素进行九水平均匀试验,用回归分析对其试验数据进行分析,发现碎米荠色素与多糖之间以非结合态形式共同存在粗多糖溶液中,并得出解吸粗多糖的适宜条件为解吸时间蛋白质与碎米荠粗多糖共存时,为了研究蛋白质在粗多糖溶液中被脱除的凝沉淀,离心后,沉淀经蒸馏水溶解用磷酸氢二钠絮凝,如此反复将沉淀溶解、***沉淀、磷酸氢二钠絮凝,直到共沉淀物经硫酸一苯酚法检测呈阴性为止。然后用大孔树脂吸附层析对共沉淀物进行分离纯化,层析条件是:一定浓度的样品上柱,以流速/卸剑儆门ǘサ募状家粤速/ü髦步刑荻认赐眩鹤詈笥们碇汗瞬阄鼋ü渤恋砦锝徊酱炕阄鎏跫牵荷涎馏水洗脱,控制洗脱流速为渤恋砦锎慷燃ḿ捌浣峁贡碚纯化的共沉淀物用高效液相色谱法进行纯度鉴定,用质谱法对其结构进行分析。结果表明共沉淀物为高效液相色谱纯,是一种以连接有羟基的五元环和六元环烷烃为母核,母核之间有羧酸酯键的大分子化合物。槊总渤恋砦锏男跄媛为探讨碎米荠共沉淀物的絮凝特性,选择磷酸氢二钠和氢氧化钙为絮凝试剂,通过磷酸氢二钠和氢氧化钙用量、值等单个因素对共沉淀物絮凝量影响絮凝量的因素是碱性的絮凝体系和金属离子的存在,碱性条件对共沉淀物絮凝量的影响比金属离子大。℃,蒸馏水用量为活性炭的倍,可有效解吸粗多糖,减少粗多糖的损失。槊总侄嗵恋牡鞍字使泊嫣匦基本特性,以三***乙酸为脱除碎米荠粗多糖溶液中蛋白质的试剂,进行了三***乙酸浓度、脱除温度和脱除时间等单因素试验和三***乙酸浓度和处理时间二因素九水平均匀试验。试验结果经方差和回归分析发现,温度对蛋白质脱除没有影响,/
的纯度为色谱纯,含量较大的酸性含硒多糖狿Ⅱ榉旨半乳糖残基与其它单糖残基成苷时均在和上。三***乙酸浓度和脱除时间对蛋白质脱除的影响存在显著关系,并得到脱蛋白的适宜条件:室温下,选择サ娜纫宜崤ǘ龋殉奔槊总嗵堑拇炕椒首先采用纤维素阴离子阄鼋行院退嵝院嗵欠挚#缓用葡聚糖凝胶柱层析将中性含硒多糖和酸性含硒多糖进行纯化,分别得到一个中性含硒