文档介绍：同型半胱氨酸ELISA
预期用途
此试剂盒用于血浆或血清中总同型半胱氨酸的检测
简介
同型半胱氨酸是一硫醇基,含蛋氨酸胞内脱***作用产生的氨基酸
同型半胱氨酸分解产生半胱氨酸或蛋氨酸,维他命B6的转硫途径中同型半胱氨酸分解成半胱氨酸,经另一蛋氨酸合成酶途径在叶酸和钴***素作用下回转成蛋氨酸
实验原理
此实验采用的是酶免竞争法,样本中的SAH和固化的SAH竞争结合微孔板上包被的抗SAH-抗体。洗涤除去未结合的,加入HRP标记的兔抗鼠二抗,加入底物液后在酶标仪上检测,样本中总的同型半胱氨酸浓度与其吸收值成反比
试剂盒成分:
(反应缓冲液) 1瓶 54ml (即用型)棕色盖
(腺嘌呤核苷/DTT) 1支 (即用型)白色盖
(SAH-水解酶) 1支 (即用型)白色盖
(酶抑制剂) 1瓶 55ml (即用型)橙色盖
E(腺嘌呤核苷脱氧酶) 1瓶 55ml (即用型)红色盖
(抗SAH抗体) 1瓶 25ml (即用型)绿色盖
(酶联结物) 1瓶 15ml (即用型)蓝色盖
(底物液) 1瓶 15ml (即用型)紫色盖
(终止液) 1瓶 15ml (即用型)黄色盖
(浓缩10X) 1瓶 160ml(即用型)黑色盖
白色盖
浓度分别为2,4,8,15,30,50μmol/L
12x8孔
预包被 S-腺苷-L同型半胱氨酸
质控盒另配(A x H00101)
实验准备和保存
1. 所有系列试剂须2--8℃贮存。
2. 样本预处理液(SPS)由试剂A、试剂B及试剂C配制而成。SPS只能保存1小时,需现配现用
3. 洗涤液在使用前,用双蒸水按1:10配制。配制后可在室温(18—25℃)存放4周
4. 试剂D和H须在黑色瓶中避光。
5. 微孔扳条须保持干燥,平衡至室温(18—25℃)至少需要2个小时,平衡至室温后才能开袋取出。
6. 剩余板条须密封在袋内保存。
7. 避免将试剂盒暴露在37℃
样本收集和预处理
1. 因为同型半胱氨酸在采样后会在红细胞中合成;因而重要的是在取样后尽快离心分离出血清和血浆,样品应保持低于8℃至分离
2. 有数字显示EDTA抗凝血浆与采样后前两个小时的血清在测定同型半胱氨酸时有至少10%的差异。
3. 所进食的食物会影响循环同型半胱氨酸水平,富有蛋白质的肉类会提高总的同型半胱同型膀胱氨酸-1
氨酸水平,应避免在采样的前一天进食该类食物。
4. 标准的采样过程是决定性的,取决于以上的影响因素。
5. 使用前混匀样本是必要的。
6. 血清和血浆样本在2-8℃可贮存12周,室温(18-25℃)3周。若温度保持低于-20℃可贮存8个月。
7. 血红蛋白、胆红色或甘油三酯不会干扰本实验。
试验步骤
将试剂盒平衡至室温,建议在实验的前一天取出试剂盒在室温下过夜,我们建议