文档介绍：生物工程专业
《生化技术》课程实****指导书
张如新、任光云编著
邵阳学院生物与化学工程系
2012年10月
目录
实****项目一、超临界CO2萃取山茱萸中有效成分熊果酸………………1
实****项目二、加携带剂超临界CO2萃取山茱萸有效成分熊果酸………5
实****项目三、HPLC法测定萃取物中有效成分熊果酸的含量…………7
实****项目一、山茱萸有效成分熊果酸的超临界CO2萃取
一、实验目的与要求
1、掌握超临界CO2萃取的原理
2、掌握超临界CO2萃取的操作
3、掌握材料的处理与准备
二、原理
超临界CO2萃取是利用欲分离物质与杂质在超临界CO2中溶解度不同而达到分离的一种萃取技术。超临界流体兼有气、液两者的特点,密度接近于液体,粘度和扩散系数接近于气体,它不仅具有与液体溶剂相当的溶解能力,而且具有优良的传质性能。超临界流体CO2萃取技术就是利用这种超临界流体的特殊性质,在高压条件下与待分离的固体或液体混合物接触,有效成分能溶解在超临界流体CO2,通过调节系统的操作压力和温度,可萃取所需要的物质。随后通过降压或升温的方法,降低超临界流体CO2的密度,使萃取物溶解度降低,使目的物与超临界流体分离,萃取得到有效成分即目的物。
三、材料与仪器
1、材料:山茱萸
2、CO2气体
3、仪器: 超临界CO2萃取装置
4、植物样本粉碎机
四、操作步骤
1、材料的准备
选择优质的山茱萸材料,把其中的杂质去掉,称取1公斤山茱萸在70~100ºC烤箱中烘烤3~4小时至完全干燥为止。用粉碎机粉碎(过40目筛),粗粉要再次粉碎,直到能过40目筛。
2、萃取
称取100 g 粉碎的山茱萸装入萃取缸并把萃取缸安装好,在压力为30MPa、温度为40ºC下萃取3~4小时。并按CO2超临界萃取装置使用说明书(见附页)开机进行萃取操作:(注意:一定要在熟练掌握原理和操作规则情况下才正式开机操作。)
3、收集萃取物
在收集萃取物之前,应准备4个洗干净并烘干的250ml 锥形瓶。每萃取1个小时收集一次,具体操作按说明书。最后收集完后,用封口膜封好锥形瓶,贴好标签并标好组号,时间等。保存好以备后面实验。
4、记录
应认真记好实验数据,包括实验的条件(如萃取温度、压力、萃取时间等),实验结果和实验现象等。
5、仪器清理
做完实验后,应依次用自来水,蒸馏水和无水乙醇清洗萃取缸和分离缸。清理打扫实验现场,包括实验台卫生,实验室卫生。特别提醒注意关掉萃取装置总电源。
附页
CO2超临界萃取装置使用说明书
第一步:放空(关V28)
关V28、V25及V11,打开V24(可同时打开萃取缸下的开关V8)把萃取缸中的CO2放干净,至萃取压力为零。如果不放空萃取缸取不下来,没放空CO2取下萃取缸很危险。关掉V25和V11时分离缸Ⅰ和分离缸Ⅱ不需放空。如需放空分离缸Ⅰ和分离缸Ⅱ,则不要关V25和V11,也可同时打开分离缸Ⅰ和分离缸Ⅱ下面的开关。
第二步装料
当萃取缸压力为零时,取下萃取缸,称取一定量的粉碎样品装入萃取缸,再按要求装好萃取缸,一定要拧紧螺栓。
第三步萃取
1、开电源
2、开钢瓶(开到底再倒拧一圈)
3、打开V1和V28
4、开总电源,至三相电源指示灯全亮
5、开冷循环、制冷开关。
6、开萃取、分离Ⅰ和分离Ⅱ开关,并调节设定温度