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流式细胞术的基本概念
流式细胞术(FlowCytometry,简称FCM)是一种可以快速、准确、客观,并且同时检测单个微粒(通常是细胞)的多项特性的技术,同时可以对特定群体加以分选
研究对象为生物颗粒,如各种细胞、微生物及人工合成微球等
研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征,并加以定量
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散射光信号和荧光信号
前向角散射光(FSC,ForwardScatter)
入射激光的前向散射光信号
细胞相对大小及其表面积
侧向角散射光(SSC,SideScatter)
入射激光90角的散射光信号
细胞粒度及细胞内相对复杂性
荧光素与特异抗体结合,荧光抗体与细胞抗原结合越多,产生的荧光信号越强。
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CD45/SS示意图
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抗原分布
表面,胞浆,核内
是共同检测还是分别检测?
表面
胞浆
核内
CD3,CD4,CD8,tetramer
cytokines
DNA
CD3,4,8,tetramer
+
Cytokines
CD3,4,8,tetramer
+
DNA
Cytokines
+
DNA
CD3,4,8,tetramer
+
Cytokines
+
DNA
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设门
08-03307
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设门
全部细胞
门内细胞
08-03307
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血液肿瘤分类进程
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白血病免疫分型的理论基础
白血病/淋巴瘤免疫分型采用的抗原标志是表达于正常造血细胞不同分化发育阶段的分化抗原。虽然是恶性肿瘤细胞,但仍能表达正常血细胞所具有的抗原,因而仍可依据其抗原的表达谱对白血病/淋巴瘤进行免疫分型。为了正确分析白血病/淋巴瘤细胞,必须对正常造血细胞分化抗原的表达模式有充分的了解。只有熟悉正常细胞的抗原表达模式,才能辨认白血病/淋巴瘤细胞的存在。
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