文档介绍：林业科学研究,:~

文章编号:.
毛竹苯丙氨酸解氨酶基因的克隆及组织特异性表达分析
高志民, 彭镇华, 李雪平, 牟少华, 马艳军
.国际竹藤网络中心,国家林业局竹藤科学与技术重点开放实验室,北京
.中国林业科学研究院林业研究所,北京
关键词:毛竹;苯丙氨酸解氨酶;克隆;组织特异性表达
中图分类号:. 文献标识码:

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苯丙烷类代谢途径是植物代谢中一条非常重要键酶。分离编码苯丙氨酸解氨酶的基因,分析基
的途径,一切含苯丙烷骨架的物质都是由这一途径因的结构与表达特性,将有助于深人了解苯丙氨酸
直接或间接生成。苯丙烷类代谢可生成类黄***、木解氨酶的表达调控机制。
质素等多种次生代谢产物,这些次生产物在植物的近年来,越来越多的研究集中在苯丙氨酸代谢
生长发育、抗病、抗逆反应中起着重要的作用, 途径关键酶方面,以期通过调节这些酶的表达活
而苯丙氨酸解氨酶., 性,来实现有效地调节与之相应的次级代谢产物的
是连接植物初级代谢和苯丙烷类代谢、催化苯生物合成,培育出适合人类生产生活需要的植物新
丙烷类代谢第步反应的酶,是苯丙烷类代谢的关品种,如适于造纸的低木质素含量树种、高异黄***含
收稿日期:.
基金项目:国家林业局重点项目“重要竹种基因组测序及功能基因开发”;国际竹藤网络中心基本科研业务费专项资金“毛
竹细胞壁发育及其讽控机制研究”/一
作者简介:高志民一,男,河北唐山人,副研究员。博士.
通讯作者:..
林业科学研究第卷
量的大豆品种等。竹子作为我国重要的森林资源, .,:.—
由于竹材具有强度高、韧性好、硬度大等特点,在建.
筑、造纸、装饰材料等领域得到广泛的应用。毛竹—、分别与配对的第轮
是我国重要的经济竹种,以毛竹为材料进行基反应条件为:,,个循环;
因的研究,对于更好地开发利用毛竹资源具有重要℃,,℃,个循环;
的现实意义。,℃,℃,个循环。.与
毛竹中克隆了基因全长,并对其进行了配对的巢式反应条件为:℃,
相关分析和组织特异性表达研究。,,个循环。产物经回收、连
接后送公司测序。
材料与方法
. 基因的组织特异性表达检测
. 实验材料采用法确定基因在不同器官
年月用购自广西省柳州地区的毛竹中的表达量。以毛竹基因作内标
..种子进正向弓物:一.,
行播种,在国际竹藤网络中心培养室培养成实生苗, 反向引物:一.
盆植于直径为的塑料盆中,培养介质为混合,反应条件:,;,
土腐殖质土:蛭石:。培养条件为℃,每天,℃,循环数为个;延伸。
光暗培养时间为/。年月取新鲜、无
结果与分析
病虫害的叶片、叶鞘、幼茎和根,用于提取。
. 总提取与合成. 基因保守区片段的克隆与分析
采用公司的提取毛竹以毛竹叶片反转录合成的作为模
新鲜材料的【,用公司的反转录试剂板,用引物和引物进行扩增反应,产物在%
盒合成。采用公司的的琼脂糖凝胶中电泳,染色结果显示:在
试剂盒合成和。左右有条亮