文档介绍：水果、蔬菜维生素C含量测定法
抗坏血酸标准溶液(1mg/ml):称取100mg()抗坏血酸**,溶于浸提剂中并稀至100ml。现配现用。**%以上,可不标定。如试剂发黄,则弃去不用用。若要检查其纯度,可按附录B方法标定。 2,6-二***靛酚(2,6-二***靛酚吲哚酚钠盐)溶液:称取碳酸氢钠52mg溶解在200ml热蒸馏水中,然后称取2,6-二***靛酚50mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中。冷却定容至250ml,过滤至棕色瓶内,保存在冰箱中。每次使用前,用标准抗坏血酸标定其滴定度。即吸取1ml抗坏血酸标准溶液于50ml锥形瓶中,加入10ml浸提剂,揺匀,用2,6-二***靛酚溶液滴定至溶液呈粉红色15s不褪色为止。同时,另取10ml浸提剂做空白试验。滴定度按式(1)计算: 滴定度T(mg/ml)=C·V/
(V1-V2)…………………………………………(1) 式中:T──每毫升2,6-二***靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数; C──抗坏血酸的浓度,mg/ml; V──吸取抗坏血酸的体积,ml; V1──滴定抗坏血酸溶液所用2,6-二***靛酚溶液的体积,ml; V2──滴定空白所用2,6-二***靛酚溶液的体积,ml。 白陶土(或称高岭土):对维生素C无吸附性。5 测定步骤 样液制备:称取具有代表性样品的可食部分100g,放入组织捣碎机中,加100ml浸提剂,迅速捣成匀浆。称10~40g浆状样品,用浸提剂将样品移入100ml容量瓶,并稀释至刻度,摇匀过滤。若滤液有色,。 滴定:吸取
10ml滤液放入50ml锥形瓶中,用已标定过的2,6-二***靛酚溶液滴定,直至溶液呈粉红色15s不褪色为止。同时做空白试验。6 结果计算 计算公式: 维生素C按式(2)计算: 维生素C(mg/100g)=〔(V-V0)·T·A/W〕×100………………………………(2) 式中:V──滴定样液时消耗染料溶液的体积,ml; V0──滴定空白时消耗染料溶液的体积,ml; T── 2,6-二***靛酚染料滴定度,mg/ml; A──稀释倍数; W──样品重量,g。 平行测定的结果,用算术平均值表示,取三位有效数字,含量低的保留小数点后两位数字。 平行测定结果的相对相差,在维生素C含量大于20mg/100g时,不得超过2%,小于20mg/100g时,不得超过5%。附录 A二甲苯-二***靛酚比色法(补充件) 适用范围测定深色样品中还原型抗坏血酸。 测定原理用定量的2,6-二***靛酚染料与试样中的维生素C进行氧化还原反应,多余的染料在酸性环境中呈红色,用二甲苯萃取后比色,在一定范围内,吸光度与染料浓度呈线性相关,由剩余染料浓度用差减法计算维生素C含量。 仪器设备 分光光度计或比色计。 具塞试管:50ml。 试剂(皆为分析纯) 偏磷酸:2%溶液(W/V)。 乙酸钠缓冲溶液()∶500ml50%(W/V)的乙酸钠溶液与500ml冰乙酸混合。 2,6-二***靛酚溶液:。 二甲苯。 测定步骤 标准曲线的绘制:用6只50ml具塞试管加入5ml2%偏磷