文档介绍：细胞实验论文
外来化合物对细胞生理代谢的影响—急性ZnCl2染毒对小麦幼苗茎叶组织SOD活力的影响
生命科学学院 2011级生物科学
姓名:xxx 学号:20113120xx 指导老师:张小民李翠兰
摘要:本实验以小麦幼苗为实验对象,从Zn2+的毒性的氧化损伤出发,测定染不同浓度的ZnCl2(浓度分别为200mg/L、400mg/L、800mg/L、1600mg/L、0mg/L)后小麦幼苗茎叶组织SOD的活性变化,以此探讨Zn2+对小麦幼苗茎叶组织抗氧化酶SOD的影响,为研究细胞分子水平毒性机制提供科学依据。对本实验结果的简单分析表明,Zn2+浓度为400mg/L处理小麦幼苗后,SOD酶活力达到最大值,自此之后酶活力逐渐下降。充分展现了不同浓度的Zncl2对小麦幼苗SOD酶的活性影响的不同结果。关键词:Zn2+ 小麦幼苗 SOD活力
工业污染、平常生活垃圾的不合理处置与金属矿山开采等,都会带来土壤重金属污染。土壤重金属容易被植物吸收,并在不同组织、器官中累积,对生物体产生毒性,影响植物体正常生长发育。锌(Zinc,Zn) 作为植物正常生长发育必需的微量营养元素,是植物体内众多生理代谢过程相关酶的组成部分,并在稳定和保护生物膜免受氧化损伤、保证质膜完整性、稳定细胞膜透性等方面起着重要作用。然而,过高浓度的锌会对植物产生毒性,可能导致叶片萎黄、营养失衡和光合作用受抑制,从而延缓植物生长,甚至降低农产品产量[1]。
超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)在需氧原核生物和真核生物中广泛存在,是活性氧清除系统中第一个发挥作用的抗氧化酶。植物正常代谢过程和在各种环境胁迫下均能产生活性氧和自由基,活性氧和自由基的积累引起细胞结构和功能的破坏。SOD岐化超氧物阴离子自由基生成过氧化氢和分子氧,在保护细胞免受氧化损伤过程中具有十分重要的作用。[2]
1 实验材料与方法
实验材料
小麦幼苗 (PBS) 超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒四种不同浓度ZnCl2溶液(200mg/L、400mg/L、800mg/L、1600mg/L)
实验仪器
分析天平研钵冷冻离心机紫外线可见分光光度计恒温水浴锅粗滤纸吸水纸离心管
微样进样器(50μL、100μL) 一次性塑料管 试验方法 Zncl2染毒处理
播种5~6h,萌发24~36h后将露白的种子随机摆放于培养皿中,30~40粒/皿左右,生长5天后,分别用不同浓度的Zncl2溶液处理4天。 粗酶提取液的制备
~,按1:10加入预冷的PBS液(1/2用于研磨,1/2用于清洗,小范围研磨,便于冲洗)冰浴研磨,并用剩余的PBS液冲洗入离心管,8000rpm离心15min,上清液即为5%的粗酶提取液,用于SOD酶活性的测定。
总SOD酶活测定总SOD酶活测定按表1进行
表1
【说明】通过实验探索可知粗酶提取液量为40μL时最适宜。
总SOD活力(U/g)=
对照管OD值-测定管OD值反应液总体积
÷50%?÷匀浆液浓度
对照管OD值取样样组织湿重
匀浆介质体积
【注】匀浆液浓度=
2 实验结果与分析
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