文档介绍：血清肌酸激酶操作规程
[检验原理]
在适宜的条件下,血清中的肌酸激酶可以激活串联的酶促反应,随后引发NADP向NADPH的转化。使用生化分析仪检测340nm波长处吸光度的变化,可知被检测血清中的肌酸激酶的活性。
磷酸肌酸+ADP
说明:
不同批号的试剂不能混用;新打开的试剂不宜与已用过的试剂混合在一起。否则易造成试剂稳定性下降。
[适用仪器]
本试剂盒适用于各种半自动生化分析仪及BIO-A25,松上A8,英诺华D-280,迈瑞BS-200和威图-E全自动化分析仪。
[样本要求]
样本种类:新鲜无溶血血清。
样本采集:常规静脉采血约2ML,不抗凝,置普通试管中,或采用含有分离胶的真空采血管[3]
样本干扰:对反应吸光度有干扰的样本,包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果,遇上述情况建议重新采集。
样本保存:血清样本2℃—8℃可稳定3天,-20℃可保存1个月,忌反复冻融。
[检测方法]
试剂的准备:一定量R2(参看R1瓶签)溶解一瓶R1,配制成工作液后方可使用。
检测步骤::
(1)基本操作步骤:(波长:340nm 温度:37℃比色杯光径:1cm)
(2) 全自动生化分析仪操作步骤;参数设置-工作液装载-校准-质控-样本加载-测定-结果审核-报告。具体上机参数根据基本操作步骤进行设置。
(3)半自动生化分析仪操作:将工作液和样本按照50:1的比例混合后,上机测定。具体参数详见“参考参数表”。
3、校准: 使用K因数校准。
4、质量控制,每天对样本进行检测之前,须进行质量控制,以保障测试系统的分定性。建议使用Roche质控品进行室内质控,指控品测定结果应在允许范围内。若超出质控范围,须查找原因,如仪器、试剂与质控品的状态或参数设置等。
5、检测结果的计算:生化分析仪会自动给出检测结果。
理论计算公式:
。
[参考范围]
根据参考文献[4]获得以下参考范围:
男性
38U/L—174U/L
女性
26U/L—140U/L
【检验结果的解释】
专业人员负责检验结果的审核。检验结果会受到检验者年龄、性别、体重等的影响。通常情况下其结果如在参考范围内,则认为血清肌酸激酶活性异常。检验结果如出现与临床不符甚至相的情况下,应分析余查找原因。
[检验方法的局限性]
乳糜(Intralipid) 125mg/dl 时,对测定结果没有明显干扰
血红蛋白 1000mg时,对测定结果没有明显干扰。
Vc 1000时,对测定结果没有明显干扰。
胆红素 40mg时,对测定结果没有明显干扰。
检测结果与所使用的仪器种类和型号相关,
使用不同的仪器或校准品,检测结果可能会有差异。
[产品性能指标]
试剂空白吸光度:在波长410nm(400nm-420nm) (光径1cm)处,试剂空白吸光度A ;试剂空白吸光度变化律( A/min)
准确度:测定值与靶值的相对偏差不超过+10%
分析灵敏度:浓度为230U/LD的ALP所引起的吸光度变化律( A/min)-。
批内瓶间差:批内瓶间的变异系数(CV)应 5%
批间差:试剂盒的批间差(R)应《6%
线性范围:在IU/L-700U范围内,线性范围检测应符合下列要求:
当结果为一阶线性(二级方程和三级方程的非线性系数t检验的Sig值平均 )时,一级方程线性相关系数(r)应 :
当结果为二级线性(二级方程或三级方程的非线性系数t检验的Sig值 )时,线性相关系数(r)以一级方程为判断依据应 ,平均线性偏差不应超过5%。
试剂效期稳定性:原包装试剂在2°C-8°C 避光贮存,有效期为36个月。
试剂开盖稳定性:试剂溶解后开盖,在2°C-8°C 避光保存,稳定期3天。
【注意事项】
试剂避免直接接触皮肤和眼睛,切勿吞咽。
使用后的器具须按照规定处理,扔入指定垃圾箱内,不可随处乱扔,防止环境污染和二次使用。
由于运输过程产生渗液或漏液的产品,或在运输贮存中没有按照说明书要求进行维护的试剂,不可使用。
本产品仅适用于临床体外诊断。
如医院使用其它公司校准品进行校准,请各医院根据实际需要进行验证,当试剂更换批号、出现质控漂移、仪器做完保养、重要零件更换时应重新进行校准。
如医院使用其它型号的全自动生化分析仪,请各医院根据实际需要进行验证。
[参考文献]
肌酸激酶同工酶操作规程
【检验原理】
CK-MB是由M亚基和B基组成,实际中的抑制CK-M抗体可以专一性抑制CK-M亚基的活性。在适宜的条件下,仅CK-B亚基可以激活串联的酶反映,随后引发NADPH的转化。使用生化分析仪检测340