文档介绍：辽宁师范大学
硕士学位论文
葡萄WRKY基因的克隆和功能分析
姓名:黄佳玲
申请学位级别:硕士
专业:遗传学
指导教师:侯和胜
2012-05
要摘本研究以葡萄为对象,探索��转录因子参与基因表达调控反应的分子机制。从葡及����进行克隆,得到了含有完整开放阅读框和保守��结构域的��序位点等进行了分析,分析结果表明葡萄����友����属于第二类��蛋��捎檬凳庇ü舛�縋�的方法,分析了葡萄����及����基因在�、��菇�似咸裋����癡�����虺�泶镌靥澹��门└司�榈挤ㄗ;�饽�上述研究初步明确了葡萄����及����两个转录因子在非生物胁迫中葡萄在生长发育过程中经常会遇到病虫害等生物胁迫以及干旱、低温、机械损伤等非生物胁迫,他们会影响作物的产量和品质,频繁使用农药化肥不能从根本上解决问题,只有研究高抗性新品种才是解决植物病虫害及环境胁迫的技术对策。研究表明,当植物受到生物或非生物胁迫后,转录因子会结合到��囟ㄎ坏闵希�せ罨蛞种葡掠位��的表达,从而在植物防御反应中发挥调控作用。因此,利用植物本身具有的转录因子来进行经济作物的遗传改良是一条可行的技术路线。��是植物特有的一类转录因子,萄中克隆得到�鯳��易寤�颍�直鸲云渥隽松�镄畔⒀Х治觥⒈泶锬J椒治鲆�及超表达抗性分析,主要内容如下:��云咸裌��B家蜃蛹易宓��龀稍苯�型�葱苑治觯�〕�个基因����列,对其进行了生物信息学分析:�.利用生物信息学相关网站和软件,对两个蛋白的氨基酸序列组成、信号肽及磷酸化白,都含有�霰J氐腤��峁褂颍�痪哂泻硕ㄎ恍藕牛�⑶以谒堪彼帷⑺瞻彼峒�酪氨酸处都有磷酸化位点。�.利用���及���对����、����蛋白及其他物种的��蛋白进行了序列比对及同源进化树的构建,分析发现这些蛋白均有不同程度的相似,相似区域主要集中在保守的��结构域处。�及机械损伤下表达量的变化,分析表明两个基因在胁迫条件下,表达量均发生了明显的变化,并呈现一定的规律。芥,筛选鉴定后获得转基因拟南芥纯系植株。的表达规律,为进一步研究植物抗逆调节的分子机制奠定了基础,为高抗性植株的培育提供理论参考。关键词:��;葡萄;拟南芥;生物及非生物胁迫辽宁师范大学硕士学位论文
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古�葡萄����,属于被子植物门、双子叶植物纲、鼠李目、葡萄科、葡萄属,为落叶藤本植物,原产于欧洲、西亚和北非一带,葡萄的营养价值很高,品种丰富,总体上可分为食用葡萄和酿酒葡萄两大类,产量几乎占世界水果产量的四分之一,已经成为世界上最重要的水果之一。但是世界范围内的绝大部分葡萄都来源于同一祖先�分奁咸�������」苷飧銎分忠逊只�鲈���多个葡萄品种,但是其遗传可变性非常有限,我们栽种的大部分葡萄品种易感染病毒、细菌和真菌,抵抗外界逆境的能力也不强,霜霉病、白腐病、炭疽病等病害时常发生,同时干旱、低温、高盐等环境变化的胁迫,这些对葡萄果实的品质和产量都会造成很大损失,同时对枝条的生长和来年的长势也有一定影响,因此,培育出高抗逆性葡萄新品种十分必要。随着植物抗逆分子机理研究的不断深入及分子生物学技术的不断完善,植物抗逆新品种的研究日趋激烈,这些研究主要集中在细胞水平、生理代谢水平和分子水平等层次上,尤其是在分子水平的研究最为活跃。研究表明:在长期的进化过程中,植物形成了�肿陨矸烙�低常�谝恢址烙�低臣聪低郴竦眯钥剐裕�吹敝参锸艿讲≡��那秩�后,会出现细胞壁增厚、活性氧增加等局部过敏反应,从而有效抵御病原菌的进一步侵染,起到自我防御的作用。另一种防御系统即在逆境胁迫下,植物体内会产生一系列磷酸化级联反应,将信号传递至细胞核内,通过细胞核内特有的转录因子与其他相关蛋白之间的相互作用,激活或抑制防卫反应基因的转录表达,从而对逆境作出防御反应,可见转录因子对于植物逆境防御应答反应至关重要。植物体内存在大量的转录