文档介绍：复旦大学
硕士学位论文
人类SCDR9基因的克隆及其功能研究
姓名:刘屾
申请学位级别:硕士
专业:遗传学
指导教师:余龙
20050425
论文中用到的缩写���篠啦瞳丛�猯堑垒￡�铡炱ヲ选耆�臁炖鹨档┐�△鲞�锢锬�墨璺塑壅堕丝墨型��堕墨呈查堂堡圭兰堡垒苎���谵�����簊��—����:����������簁��������:�������篛�������:���������簆����������:������築��������:����������篹����������篏���������/��������簊��—����.������籦�����������������
中文摘要�即�一个由很多成员组成的大家族,其中大部分是��或���览档难趸�乖�接并从人肝脏��文库中克隆到新基因���8没�虮嗦氲牡鞍字示哂斜�守的短链脱氢酶,还原酶结构域。在原核表达系统中对����蚪�辛酥刈楸�达。����峁�允荆琒��普遍表达,但是在肝中高表达,在骨髓中也有雌二醇脱氢,具有�胞质里面,但是不分散,呈点状分布与细胞质里面。研究结果暗示了该酶可能属短链脱氢酶,还原酶���.����������/�����,��家族是酶。在本论文第一部分中,我们通过同源筛选的策略,用��为信息探针,拼高表达。酶活性测定结果初步显示,���赡苣芤訬��魑8�复呋��籦���霍抢喙檀纪亚饷富钚裕珽��ㄎ幌允靖没�蚨ㄎ辉谙�于�一����盗校�阽薮嫉拇�恢衅鹬匾W饔谩�������甒����复旦大学硕士学位论文人类����虻目寺〖捌涔δ苎芯������������/���������������瓾��������������琧���������/�����.���������琫������猻�����.����������.��������甧������一�������������.����������甿����.���������甀����甌�
前言酶,这些家族成员大部分由����个氨基酸残基组成,大部分成员至少含有两结合底物,其中包含底物特异性和催化活性相关的氨基酸。这些家族的许多成员别出许多成员,研究显示,��冈诓溉槎�锏纳�常�⒂�����逝郑����抢喙檀纪亚饷福��固醇脱氢酶以及其它的成员。通常这些酶具有不同的底物特异性,在类固醇及激素代谢中催化不同步骤的生化反应。例如,���抢喙檀纪亚饷复呋�奂に睾痛萍に睾铣傻墓丶�街��霍抢喙檀纪亚饷赣肫ぶ始に氐幕罨�约笆Щ钣泄亍iПǖ溃�矶嗳死�疾病与羟类固醇脱氢酶有关,因为它们的酶活性丧失或异常表达会导致生物体类固醇的水平异常。��易宄稍钡囊桓鲋匾L匦允窃谝患督峁雇�葱缘停�ň�有相似的三级结构。在几乎所有的��易宄稍敝写嬖谟辛礁龈叨缺J氐幕�颍�与�����岷系腘端����基序;催化活性相关的����素的脱氢/力�夥从Α8�菝傅姆⑾窒群蠛臀镏值耐�葱裕�衷诳煞治�����瓾�����産��薮纪亚饷冈诶喙檀技に氐拇�恢衅鹬匾W饔茫�我们通过同源筛选的策略,用人的一个视黄醛脱氢酶基因在����里筛选��蛄胁⒎⑾至艘桓龌�颍�⒔�浯尤烁巫橹痗��目庵锌寺 8没��编码的蛋白质具有保守的短链脱氢酶,还原酶结构域,将其命名为����������/�������被�嵝蛄斜冉舷允菊飧鲂碌耐频嫉��狧��有较高的同源性和结构相似性,氨基酸序列一致性为�%,可能是�一��羟类固醇脱氢酶这个亚家族的新成员。短链脱氢酶,还原酶���.����������/�����,��家族是一个由很多成员组成的大家族���渲写蟛糠质荖�或��依赖的氧化还原个������谝桓鯠���岷细�福�ǔN狽����,第二个���来自原核生物,近来,在哺乳动物的胎盘,肝,前列腺,肾以及其它的组织中鉴血压发病,肿瘤发生等生理及病理过程中发挥作用�,�,��囊桓鲅羌易迨�羟类固醇脱氢酶,包括��霍抢喙檀纪亚饷福���抢��霍抢喙檀纪亚饷复呋�亚獗硇弁�转变成��巯┒�#��序�,�俊4蟛糠諷�酶以二聚体或四聚体起作用。���薮纪亚饷���狧��囚抢喙檀纪亚饷秆羌易宓某稍敝�一,催化具有生理活性的雌激素和活性弱的雌酮的转变,以及�一��位的雄激白与人的�【�。�����.���复旦大学硕士学位论文人类����虻目寺〖捌涔δ苎芯����������������
一、材料和试剂��实验耗材及试剂��菌株、质粒、细胞株和实验动物大肠杆菌��鼍�辏罕臼冶4�大肠杆菌���辏罕臼冶4���.�靥澹篜���公司产品�����静������靥澹篶�����静������公司产品��文库:克隆用的人肝的��文库购自����公司:文库载体为噬菌体��┰鍪约梁校汗鹤陨虾����公司。��������。��和����培养基�������