文档介绍：免疫组化结果的分析和判断
第一节免疫组化结果的判断原则
 
免疫组化结果的判断原则概括起来有以下几点:
⒈必须同时设对照染色。没有对照染色的免疫组化染色结果是不可信的。
⒉抗原表达必须在特定部位。如LCA应定位在细胞膜上;CK应定位在细胞浆内;
PCNA及p53蛋白应定位在细胞核内;EMA应定位在细胞膜上,等等。不在抗原所在部位的阳性着色,一概不能视为阳性。
⒊阴性结果不能视为抗原不表达。由于检测方法灵敏度有高低之分,有时可因染色方法灵敏度不够,而导致阴性反应,判断时应注意。
⒋尽量避开出血、坏死及切片刀痕和界面边缘细胞的阳性表达,特别是酶免疫标记。因为这类阳性着色多系内源干扰,或系人为因素所致。
* 第二节
对照染色设计
(一)对照染色的目的
设对照的目的是为了排除假阴性和假阳性。假阴性的原因主要有三:①组织处理不当,抗原丢失过多或被遮蔽;②抗体失活、效价过低或稀释度不合适(主要指一抗,即特异性抗体);③染色步骤遗漏及差错,或显色剂的选择、缓冲液的pH和离子强度不当等。
假阳性均系由多种因素造成的非特异着色所致,原因主要有:①自发荧光或内源酶等干扰;②抗体试剂不纯(特别是一抗);③操作失误,如污染、切片干枯或显色剂操作不当等;④Fc受体的干扰,等等。
(二)对照的种类及其选用目的
对照染色大致可分为:阳性组织对照、阴性组织对照及阴性试剂对照和自身对照四大类: