文档介绍：血凝(HA)与血凝抑制(HI)试验
一、实验目的
二、实验内容
三、实验原理
四、实验材料
五、实验方法与结果判定
六、注意事项
七、新城疫背景介绍
一、实验目的
1、掌握血凝和血凝抑制试验的基本原理、操作方法和结果判定方法
2、了解新城疫有关背景知识
二、实验内容
1、血凝试验(HA)检测新城疫抗原
2、血凝抑制试验(HI)检测新城疫抗体
三、实验原理
1、血凝试验(HA)原理:某些病毒或病毒的血凝素能选择性地使某种动物地红细胞发生凝集,这种凝集红细胞的现象称为血凝(HA),也称直接血凝反应。
病毒颗粒
红细胞
2、血凝抑制试验(HI)原理:当病毒的悬液中加入特异性抗体,且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时,则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或血凝素直接接触。这时红细胞的凝集现象就被抑制,称为红细胞凝集抑制(HI)反应,也称血凝抑制反应。
I am late!
抗体
抗原
四、实验材料
1、血凝板(2人/块)
2、新城疫阳性血清
3、被检血清(1份)
4、1%红细胞悬液
5、稀释液
6、移液器(50ul, 2人/把)
7、枪头
五、实验方法与结果判定
血凝试验(HA)
1、在血凝板上第一排的1-12孔内各加入50ul生理盐水
2、在第1孔内加入50ul病毒抗原,然后依次倍比稀释至第11孔,最后弃50ul
3、每孔加入1%鸡红细胞悬液50ul
4、轻轻振荡均匀,后放于室温或37℃中静置30分钟
5、结果判定
结果判定标准
1、++++:红细胞呈细沙样均匀铺于孔底,即100%凝集;
2、+++:红细胞均匀铺于孔底,当边缘不整齐而稍向孔底集中,即75%凝集;
3、++ :红细胞形成一个环状,四周有凝集块,即50%凝集;
4、+ :红细胞于孔底形成圆团,边缘不够光滑,四周稍有凝集块,即25%凝集;
5、- :红细胞于孔底形成圆团,边缘光滑整齐,即无凝集;