血凝与血凝抑制实验.ppt

文档介绍：血凝血凝(HA)(HA)与血凝抑制与血凝抑制(HI)(HI)试验试验一、实验目的一、实验目的二、实验内容二、实验内容三、实验原理三、实验原理四、实验材料四、实验材料五、实验方法与结果判定五、实验方法与结果判定六、注意事项六、注意事项七、新城疫背景介绍七、新城疫背景介绍一、实验目的一、实验目的11、掌握血凝和血凝抑制试验的基本原理、操、掌握血凝和血凝抑制试验的基本原理、操作方法和结果判定方法作方法和结果判定方法22、了解新城疫有关背景知识、了解新城疫有关背景知识二、实验内容二、实验内容11、血凝试验、血凝试验(HA)(HA)检测新城疫抗原检测新城疫抗原22、血凝抑制试验、血凝抑制试验(HI)(HI)检测新城疫抗体检测新城疫抗体三、实验原理三、实验原理11、血凝试验(、血凝试验(HAHA)原理:某些病毒或病毒的)原理:某些病毒或病毒的血凝血凝素素能能选择性地选择性地使某种动物地使某种动物地红细胞红细胞发生凝集,这种发生凝集,这种凝集红细胞的现象称为血凝(凝集红细胞的现象称为血凝(HAHA)),,也称直接血凝也称直接血凝反应。反应。病毒颗粒红细胞22、血凝抑制试验(、血凝抑制试验(HIHI)原理:当病毒的悬液中加入)原理:当病毒的悬液中加入特异性抗体特异性抗体,且这种抗体的量足以,且这种抗体的量足以抑制抑制病毒颗粒或其病毒颗粒或其血凝素时,则血凝素时,则红细胞表面的受体红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或就不能与病毒颗粒或血凝素直接接触。这时红细胞的凝集现象就被抑制,血凝素直接接触。这时红细胞的凝集现象就被抑制,称为红细胞凝集抑制(称为红细胞凝集抑制(HIHI)反应,也称血凝抑制反应。)反应,也称血凝抑制反应。I am late!抗体抗原四、实验材料四、实验材料11、血凝板(、血凝板(22人人//块)块)22、新城疫阳性血清、新城疫阳性血清33、被检血清(、被检血清(11份)份)44、、11%红细胞悬液%红细胞悬液55、稀释液、稀释液66、移液器(、移液器(50ul, 250ul, 2人人//把)把)77、枪头、枪头五、实验方法与结果判定五、实验方法与结果判定血凝试验(血凝试验(HA)HA)11、在血凝板上第一排的、在血凝板上第一排的11--1212孔内各加入孔内各加入50ul50ul生理生理盐水盐水22、在第、在第11孔内加入孔内加入50ul50ul病毒抗原,然后依次倍比稀病毒抗原,然后依次倍比稀释至第释至第1111孔,最后弃孔,最后弃50ul50ul33、每孔加入、每孔加入11%鸡红细胞悬液%鸡红细胞悬液50ul50ul44、轻轻振荡均匀,后放于室温或、轻轻振荡均匀,后放于室温或3737℃℃中静置中静置3030分分钟钟55、结果判定、结果判定+505050256 ×8-505050512×9-5050501024 ×10-5050502048×11红细胞对照128 ×64 ×32×16 ×8×4 ×2×-+++++++++++++++++++++++++结果5050505050505050红细胞弃5050505050505050抗原5050505050505050生理盐水127654321血凝效价测定结果判定标准结果判定标准11、++++:红细胞呈细沙样均匀铺于孔底,即、++++:红细胞呈细沙样均匀铺于孔底,即100100%凝集;%凝集;22、+++:红细胞均匀铺于孔底,当边缘不整齐而、+++:红细胞均匀铺于孔底,当边缘不整齐而稍向孔底集中,即稍向孔底集中,即7575%凝集;%凝集;33、、++++:红细胞形成一个环状,四周有凝集块,即:红细胞形成一个环状,四周有凝集块,即5050%凝集;%凝集;44、、++:红细胞于孔底形成圆团,边缘不够光滑,四:红细胞于孔底形成圆团,边缘不够光滑,四周稍有凝集块,即周稍有凝集块,即2525%凝集;%凝集;55、-、-:红细胞于孔底形成圆团,边缘光滑整齐,即:红细胞于孔底形成圆团,边缘光滑整齐,即无凝集;无凝集;