实验技术三细菌的单染色法.ppt

文档介绍：实验技术三细菌的单染色法
一、实验目的
学****微生物涂片、染色的基本技术;
掌握细菌的单染色法;
初步学会无菌操作技术;
巩固显微镜油镜的使用方法。
二、基本原理
细菌体积微小,较透明,未经染色不易识别,借助于染色法可使细菌着色,与背景形成鲜明的对比,易于在显微镜下观察。
单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的方法。因细菌蛋白质等电点较低,当它生长于中性、碱性或酸性溶液中时常带负电荷,故易于与碱性染料结合,使其着色。
三、实验器材
菌种
试剂
其他器材
枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌
生理盐水、吕氏碱性美兰染液、齐氏复红染液
或草酸铵结晶紫染液
显微镜、酒精灯、载玻片、接种环、双层瓶、擦镜纸等
四、操作步骤
载玻片要洁净无油迹;滴生理盐水和取菌不宜过多;涂片要均匀,不宜过厚
热固定温度不宜过高(以玻片与手背接触感到不烫手为宜),否则会改变甚至破坏细胞形态
以染液刚好覆盖涂片薄膜为宜
水洗时,不要直接冲洗涂面,而应使水从载玻片的一端流下。水流不宜过急、过大,以免涂片薄膜脱落。
吸水纸吸净或吹风机吹干
涂片
干燥与固定
染色
水洗
干燥
镜检
思考题
1. 你认为制备细菌染色标本时,尤其应该注意哪些环节?
2. 为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察?
3. 如果你的涂片未经热固定,将会出现什么问题?如果加热温度过高、时间太长,又会怎么样呢?