文档介绍：西南大学
硕士学位论文
豌豆早期结瘤素基因克隆与凝集素基因psl转化烟草研究
姓名:周小全
申请学位级别:硕士
专业:细胞生物学
指导教师:张兴国
20080501
基因�剩�亍⒎鏢删�、风口删��菇�宋���虻闹参锉泶镌靥錺�����⒗�豌豆早期结瘤素基因克隆与凝集素基因筇�转化烟草研究摘要细胞生物学专业硕士研究生研究员周小全指导教师张兴国基因导入烟草��砌疗口���㎜�.������中,共获得�个独立的岳那霉素抗性烟每一个过程中,都伴随着宿主植物及根瘤菌特异性基因的表达。前人的研究已经证明,植物鉴于此,有必要在非豆科植物上模拟豆科植物凝集素的原始表达机制,研究非豆科植物与根期结瘤素基因在根瘤发育早期表达,参与“根瘤菌——根毛”相互作用及根瘤形态发生过程,了多个关键的早期结瘤素基因,并在一定程度上阐述了它们的功能,不过它们的工作机理仍本实验通过��际醮油愣够�蜃镈�中克隆出豌豆凝集素基因�蘘�霸缙诮崃鏊���基因组��D0澹�ü�杓铺匾煲�铮��肞�技术扩基因插入到����,构建了该基因的植物表达载体��.��@�门└司�榈挤ń�珃结瘤固氮是豆科植物与根瘤菌专一性作用的结果。在根瘤菌的第一步入侵至根瘤形成的凝集素在豆科植物识别根瘤菌的过程中起着不可缺少的重要作用,通过豆科植物间凝集素基因的转化,可使一些豆科植物识别原本不能识别的根瘤菌。但是,人们在利用人上启动子将豆科植物凝集素基因转化剑��撼伎浦参锸保�⑽茨苁狗嵌箍谱;�蛑仓晔侗鹣嘤Φ母�鼍��瘤菌的相互作用。结瘤素基因�������侵柑匾斓卮嬖谟诟�鼍�腥静��母�鱿赴�胁⒉斡牍采�固氮作用的植物基因,它们对于根瘤结构的形成及维持、同氮活性的保护以及�猯氮产物的代谢等都有重要作用。根据表达时间的先后,它可分为早期结瘤素基因和晚期结瘤素基因。早对植物与根瘤菌之间的信息传递、根瘤菌的侵染及根瘤的形成有着重要作用。目前已经发现有待进一步阐明。这些关键早期结瘤素基因在转化到非豆科植物中后,是否能发挥相应的功能,也需要进一步的探索。用农杆菌介导法将眇,基因导入烟草。主要实验结果如下:��蹋��虻目寺⒈泶镌靥骞菇ḿ白;�滩�以豌豆�,摊所册�饿�增获得芦,基因。序列分析表明,该基因全长���,包括编码��霭被�岬���的开放阅读框、���的��丝刂魄����的��朔欠�肭�S胍驯ǖ赖男蛄��������录号����啾冉希�塑账嵝蛄屑巴频嫉陌被�嵝蛄型�葱苑直鹞���%和��ァ=�ǎ�
以豌豆基因组��D0澹�ü�杓埔欢蕴匾煲�铮��肞�技术扩增获得风嬲�喊�以豌豆基因组��D0澹�ü�杓铺匾煲�铮��肞�技术扩增获得��窪基启始密码子��S擘鑑��公布的已知序列����完全一致。以豌豆基因组��D0澹�ü�杓铺匾煲�铮��肞�技术扩增获得粥�以��颉�关键词:豌豆;凝集素基因;早期结瘤素基因:尸�者希��换��眨�┯揄省廾���愣笰鼹Ⅲ,��虻目寺���愣筊圈、,∞.�鼗�虻目寺���愣筺固旧���虻目寺��的��丝刂魄�S隚����竟ú嫉囊阎P蛄�����啾龋�浜塑账嵝蛄屑巴撇獾�因。序列分析表明,该基因全长�����ū嗦��霭被�岬���的开放阅读框、���的��丝刂魄���西南人学硕十学位论文草株系,移栽后全部成活并开花结果。��觳獬醪饺范�蹋��蛞炎H胙滩莼�蜃橹小�基因。序列分析表明,该基因全长���,含有编码��霭被�岬���的开放阅读框和氨基酸序列的同源率分别为�.��仅有�黾罨�煌�和��ァ�序列分析表明,该基因全长���,包括编码��霭被�岬����的开放阅读框、����的��朔欠�肭�S隚��鷎公布的己知序列�����相比,其核营酸序列及推测的氨基酸序列的同源率分别为�.�ズ��%。�的��朔欠�肭��浞�肫羰济苈胱硬皇浅<�摹蘵’���窍∮蟹����
孤�衏���鸍,刎,风·�緔��觟����蛂���砣鏽����声,����施行口幻施�傲���鏓�簟廾甮饥�瑆����ā坝舠口�Ⅷ聊�������腸�����琒������畁���鯾�������劬�������砌拓��豻���疽籰���躶弛�鲢�砌.��舀�鵷��撇��������������畆��仃��������莋锄�Ⅸ����������仃�∞缸�∞锄����.�缸����础斌:��.�����癿��尸缸姗阳咖姗����珻�������適����恚瓼�陌印痵������锄�雄鮰����陀�印������骼����陀�����硫�����叫,�∞���妇��������∞���硎硼�����彻�������,麟�������缸�������∞���,�����豫����膃矾���誸�蓿畁���锄�鰕�岫���仃���硫��ァ蓿�鷇芦,�芦,�騝�����,觚���,�硫����