单增李斯特菌的检验方法.doc

文档介绍：单增李斯特菌的检验方法
增菌:
EB肉汤
LB肉汤(根据我的实验结果和请教其他老师的说法,LB增菌效果优于EB)
LB分为LB1和LB2,两者基础培养基相同,区别在于添加辅助试剂丫啶黄、萘啶酮酸的量(基础培养基--杭州天河生物试剂公司;丫、萘—上海疾控中心。上海的辅助试剂已按一定浓度配置成溶液,使用起来比较方便)
25g样品加入到225mlLB1增菌液中,30℃培养24h,,30℃培养24h。
选择分离
挑一环LB2增菌液划线接种到科玛嘉选择性培养基上,37℃培养24h,观察现象,可疑菌落在此培养基上为兰色,周围有白晕的菌落。
(国标上使用的选择性培养基是MMA,但是其选择性不强,科玛嘉选择性培养基是法国制造,选择性比MMA强的多,而且现象明显,许多发达国家使用。此培养基是国标编委白萍女士向我推荐的)
生化实验
挑可疑菌落穿刺接种到SIM,25℃培养3---5d,观察伞状生长情况、TSI(三糖铁)斜面30℃培养24h—48h,观察,单增李斯特菌在TSI上应该是底面、斜面均产酸,不产H2S,不产气的培养物.
这是单增李斯特菌落在SIM动力培养基上的伞状情形
再挑取TSI上培养物接种 其他生化管。
七叶苷
鼠李糖
木糖
甘露醇
尿素
硝酸盐还原
VP
MR
H2O2
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